去白细胞优化富血小板血浆对早期退变椎间盘髓核来源干细胞生物学的影响
发布时间：2021-03-21 18:36
第一部分兔早期退变椎间盘来源NPSCs分离、培养和鉴定目的分离、培养和鉴定兔早期退变椎间盘髓核来源干细胞（NPSCs）。方法1)选取健康新西兰大白兔,通过针刺法诱导早期椎间盘退变模型。2)获取兔健康和早期退变椎间盘髓核组织,消化后,培养。3)鉴定所分离细胞表面标志物基因表达和多系分化潜能（成骨、成脂、成软骨）。结果1)针刺法可有效诱导兔椎间盘退变。2)兔早期退变椎间盘内髓核组织消化后,体外培养,能够观察到细胞贴壁,呈集落生长,原代细胞的形态多呈纺锤样或铺路石样;细胞传代培养后,可见细胞形态变为均一的铺路石样。3)所分离、培养P2代NPSCs表达间充质干细胞（MSCs）阳性标志物基因（CD166,CD44,CD29,不表达造血干细胞表面标志物基因（CD14,CD8,CD4）;经诱导培养后,NPSCs可成骨、成脂、成软骨多系分化;同正常髓核组织中分离的NPSCs相比,早期退变椎间盘来源的NPSCs集落形成较少。结论兔早期退变椎间盘髓核组织可分离出呈集落样生长,表达MSCs阳性标志物,且具备多系分化潜能的干细胞（NPSCs）;同健康椎间盘来源NPSCs相比,早期退变椎间盘来源NPSCs集落形...
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：101 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
NPSCs分离和培养A.正常兔椎间盘MRIT2成像，可见椎间盘成较强信号（红色箭头所示）
图 2 NPSCs（健康和退变组织来源）表达 MSCs 表面标记物基因。髓落形成细胞均表达干细胞相关基因（ CD29, CD44, CD166），不表达胞表面标志物基因（CD14, CD8, CD4), 髓核细胞作为对照基本不表达胞并表明标志物，而脾脏细胞作为阳性对照均表达上述标志物。Fig.2 Expression of stem cell markers in NP-derived colony formNP-derived colony forming cells both from the early degenerated discs (and healthy discs (H-NPSCs) were positive for, but negative for CD4, CD8Spleen cells expressed all these genes as a positive control, while NP cellsnone of these genes. NP nucleus pulposus.3. NPSCs 的多向分化潜能诱导实验3.1 成脂诱导
南京医科大学博士学位论文结果1. PRP 和全血成分L-PRP 组血小板浓度为 1691.75 ± 151.89 × 109/L，P-PRP 组血小板浓度为1749.13 ± 128.35 × 109/L。全血中血小板浓度为 440.50 ± 60.18 × 109/L，其浓度约为PRP中血小板浓度三分之一（图1a）。全血中白细胞浓度为 8.92 ± 1.03 × 109/L，L-PRP 组白细胞浓度为 22.97 ± 2.63 × 109/L，P-PRP 组白细胞浓度为 0.23 ± 0.09 ×109/L（图 1b）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]家兔髓核间充质干细胞的体外培养与鉴定[J]. 许刚,张长春,朱坤,叶雨辰,韩仲兵. 华北理工大学学报(医学版). 2018(04)
[2]正常与退变椎间盘来源髓核间充质干细胞的生物学性能比较[J]. 刘洋,王静成,冯新民,胡乐,黄泽楠,南利平,王峰,周诗丰,张亮. 中华实验外科杂志. 2018 (06)
[3]脊索细胞特异性标志物研究进展[J]. 刘卓超,孟祥超,张兴凯. 国际骨科学杂志. 2016(05)
[4]正常与退变髓核的髓核间充质干细胞代谢活性及干性基因表达的比较[J]. 阳普山,刘子双一,陶晖,姜刚强,吴剑宏,阮狄克,王德利. 中国脊柱脊髓杂志. 2014(05)
[5]椎间盘退变的生物学治疗:从基础研究到临床应用[J]. 王善正,王宸,芮云峰. 中华临床医师杂志(电子版). 2012(17)
[6]磁性标记脂肪干细胞修复兔退变椎间盘[J]. 陈建宇,蒋新华,蔡兆熙,张娅,刘珍珍,梁碧玲. 中国介入影像与治疗学. 2012(01)
[7]富含血小板血浆凝胶复合脂肪间充质干细胞构建可注射组织工程髓核[J]. 马健,李放,任大江,吴坤,万中元,李进珍. 中国脊柱脊髓杂志. 2011(05)
[8]CONSTRUCTING ADENO-ASSOCIATED VIRUS-TGFβ3 AND COMPARING ITS BIOLOGICAL EFFECT ON PROTEOGLYCAN SYNTHESIS IN DEDIFFERENTIATED NUCLEUS PULPOUS CELLS WITH ADENOVIRUS-TGFβ1[J]. Jia-ming Sai1,2, You-gu Hu1, and De-chun Wang1 1Department of Orthopaedic Surgery, the Affiliated Hospital of Medical College, Qingdao University, Qingdao 266003 2Orthopaedic Laboratory, Orthopaedics and Traumatology Hospital, Qingdao 266003. Chinese Medical Sciences Journal. 2007(02)
本文编号：3093353
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：101 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
NPSCs分离和培养A.正常兔椎间盘MRIT2成像，可见椎间盘成较强信号（红色箭头所示）
图 2 NPSCs（健康和退变组织来源）表达 MSCs 表面标记物基因。髓落形成细胞均表达干细胞相关基因（ CD29, CD44, CD166），不表达胞表面标志物基因（CD14, CD8, CD4), 髓核细胞作为对照基本不表达胞并表明标志物，而脾脏细胞作为阳性对照均表达上述标志物。Fig.2 Expression of stem cell markers in NP-derived colony formNP-derived colony forming cells both from the early degenerated discs (and healthy discs (H-NPSCs) were positive for, but negative for CD4, CD8Spleen cells expressed all these genes as a positive control, while NP cellsnone of these genes. NP nucleus pulposus.3. NPSCs 的多向分化潜能诱导实验3.1 成脂诱导
南京医科大学博士学位论文结果1. PRP 和全血成分L-PRP 组血小板浓度为 1691.75 ± 151.89 × 109/L，P-PRP 组血小板浓度为1749.13 ± 128.35 × 109/L。全血中血小板浓度为 440.50 ± 60.18 × 109/L，其浓度约为PRP中血小板浓度三分之一（图1a）。全血中白细胞浓度为 8.92 ± 1.03 × 109/L，L-PRP 组白细胞浓度为 22.97 ± 2.63 × 109/L，P-PRP 组白细胞浓度为 0.23 ± 0.09 ×109/L（图 1b）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]家兔髓核间充质干细胞的体外培养与鉴定[J]. 许刚,张长春,朱坤,叶雨辰,韩仲兵. 华北理工大学学报(医学版). 2018(04)
[2]正常与退变椎间盘来源髓核间充质干细胞的生物学性能比较[J]. 刘洋,王静成,冯新民,胡乐,黄泽楠,南利平,王峰,周诗丰,张亮. 中华实验外科杂志. 2018 (06)
[3]脊索细胞特异性标志物研究进展[J]. 刘卓超,孟祥超,张兴凯. 国际骨科学杂志. 2016(05)
[4]正常与退变髓核的髓核间充质干细胞代谢活性及干性基因表达的比较[J]. 阳普山,刘子双一,陶晖,姜刚强,吴剑宏,阮狄克,王德利. 中国脊柱脊髓杂志. 2014(05)
[5]椎间盘退变的生物学治疗:从基础研究到临床应用[J]. 王善正,王宸,芮云峰. 中华临床医师杂志(电子版). 2012(17)
[6]磁性标记脂肪干细胞修复兔退变椎间盘[J]. 陈建宇,蒋新华,蔡兆熙,张娅,刘珍珍,梁碧玲. 中国介入影像与治疗学. 2012(01)
[7]富含血小板血浆凝胶复合脂肪间充质干细胞构建可注射组织工程髓核[J]. 马健,李放,任大江,吴坤,万中元,李进珍. 中国脊柱脊髓杂志. 2011(05)
[8]CONSTRUCTING ADENO-ASSOCIATED VIRUS-TGFβ3 AND COMPARING ITS BIOLOGICAL EFFECT ON PROTEOGLYCAN SYNTHESIS IN DEDIFFERENTIATED NUCLEUS PULPOUS CELLS WITH ADENOVIRUS-TGFβ1[J]. Jia-ming Sai1,2, You-gu Hu1, and De-chun Wang1 1Department of Orthopaedic Surgery, the Affiliated Hospital of Medical College, Qingdao University, Qingdao 266003 2Orthopaedic Laboratory, Orthopaedics and Traumatology Hospital, Qingdao 266003. Chinese Medical Sciences Journal. 2007(02)
本文编号：3093353
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