多效生长因子在骨肉瘤耐药中的作用与机制研究

发布时间：2021-03-27 07:03

　　背景骨肉瘤是儿童和青少年时期最常见的原发性骨恶性肿瘤。骨肉瘤生长迅速,具有高度侵袭性,常常在诊断时就发生了肺转移。尽管骨肉瘤的治疗在过去几十年内取得了重大的进步,但骨肉瘤对化疗药物产生耐药性是骨肉瘤患者存活率在过去几十年内始终无法显著提高的重要原因。多效生长因子（pleiotrophin,PTN）是一种神经生长因子,它参与包括细胞分化、增殖、迁移、血管生成等在内的多种人体生理过程。诸多研究证实PTN在肿瘤发生发展过程中起重要作用,有研究结果显示PTN在化疗疗效较好和较差的两组骨肉瘤患者中差异性表达,也有研究报道PTN与神经母细胞瘤的耐药性有关,但是PTN是否与骨肉瘤耐药性相关尚未见报道。目的探索PTN在骨肉瘤细胞耐药中的作用及其分子机制。方法（1）qRT-PCR和Western-blot检测PTN在骨肉瘤耐药株MG63/DOX和不耐药亲本细胞株MG63中的表达情况;（2）免疫组化ABC法检测PTN在骨肉瘤组织中的表达并探索其表达的临床意义;（3）通过药物敏感试验、克隆形成实验和裸鼠成瘤实验从体内体外水平探索PTN与骨肉瘤耐药性的关系以及其中的分子机制。结果（1）PTN在耐药细胞株MG6... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

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CCK-8试验检测骨肉瘤细胞对阿霉素的IC50值

量 PCR 检测骨肉瘤细胞中 mRNA 的表达情况（β-actin 为内中的 PTN 表达水平作为基线）e mRNAlevels of PTN in osteosarcoma cell lines were examinen was used as the reference gene and PTN expression in MG63the baseline).白在骨肉瘤细胞中的表达情况 Western blot 结果如图 1-3 所示，相对于亲代 MG63药株 MG63/DOX 细胞中 PTN 表达水平显著升胞中的表达量也显著高于其他骨肉瘤细胞系如 M和 U2OS 等细胞系。

图 1-2 实时定量 PCR 检测骨肉瘤细胞中 mRNA 的表达情况（β-actin 为内参，MG63 细胞中的 PTN 表达水平作为基线）Figure 1-2. The mRNAlevels of PTN in osteosarcoma cell lines were examined by quantitativeRT-PCR (β-actin was used as the reference gene and PTN expression in MG63 cells was used asthe baseline)..3 PTN 蛋白在骨肉瘤细胞中的表达情况接下来的 Western blot 结果如图 1-3 所示，相对于亲代 MG63 细胞，耐阿霉素的骨肉瘤耐药株 MG63/DOX 细胞中 PTN 表达水平显著升高。PTN 在MG63/DOX 细胞中的表达量也显著高于其他骨肉瘤细胞系如 MNNG/HOS、SaoS2、143B 和 U2OS 等细胞系。2


本文编号：3103120