NFAT5/zinc-ZIP8-MTF1信号途径调节软骨细胞MMP13表达的机制
发布时间：2021-04-04 00:26
背景及目的:骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是一种高发的关节退行性疾病,发生率高、极易致残,且呈年轻化趋势。目前有关其发生的机制至今仍不清楚,尚未有有效的治疗方法。研究表明,关节软骨暴露于异常渗透压的状态下可促进关节软骨基质的破坏及OA的形成。其中,渗透压诱导因子（Nuclear factor of activated T cells,NFAT5）在此过程中起重要的调节作用。近来研究发现,zinc-ZIP8-MTF1介导的分解代谢途径参与关节软骨胞外基质的破坏及OA形成的调节。由此,本文以大鼠膝关节软骨细胞为研究对象,模拟膝关节软骨细胞所处的渗透压范围,探讨NFAT5与zinc-ZIP8-MTF1信号通路之间的关系及其在骨关节炎发生发展中的作用。方法:采用免疫荧光和甲苯胺蓝染色来鉴定体外分离的软骨细胞;在体外用NaCl配置不同梯度的培养液（300mosmol/Kg-500mosmol/Kg）构建高渗细胞培养模型,模拟关节腔的高渗微环境。通过细胞计数的方法测定不同渗透压对软骨细胞的生长和形态的影响。利用实时定量RT-PCR和Western Blot等方法检测NFAT5、Zr...
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨关节炎病理学改变[6]
图1.2 zinc-ZIP8-MTF1信号通路在骨关节炎中的作用[11]Fig.1.2 zinc-ZIP8-MTF1 axis in osteoarthritis (OA)节炎（OA）是所有关节病中最常见的并且是导致残疾的主要原因。未开发出有效的用于OA的疾病缓解疗法。OA以软骨退变，滑膜炎症软骨下骨硬化为主要特征[73, 74]。OA发病机制是由合成代谢因子和分间的不平衡引起的，包括增加基质降解酶，如MMPs的产生和ADA促进软骨细胞的细胞外基质的降解，致使软骨细胞凋亡[12-14]，软骨基质降解酶中，MMP3，MMP13和ADAMTS5在OA软骨破坏中发挥研究证明，zinc-ZIP8-MTF1是实验性小鼠OA的一种发病机制[75]。Zn2+）涉及酶，核酸和蛋白质的合成过程，是体内必须的微量元素作为基质降解酶的结构成分，通过提供结构支架，例如以锌指和锌簇个通过提供多种蛋白质的活化剂或共激活剂[77]。有文献指出Zn2+是的关键因子[77]。事实上，Zn2+稳态的失衡与胚胎发育，免疫功能障疾病问题，并增加死亡率和疾病[78]。Zn2+稳态主要受膜转运蛋白
P0P4图 2.1 软骨细胞的形态特征（标尺：500 μm）Fig.2.1 Mophological characteristic of articular chondrocytes（Scale bar: 500 μm）2.4.2 II 型胶原免疫荧光染色鉴定II 型胶原作为软骨细胞的一种标记蛋白，可以用来鉴定软骨细胞。通过免疫荧光技术对 P1 细胞进行染色鉴定[93]。绿色荧光来确定标记蛋白，蓝色荧光来确定细胞核。在倒置显微镜下可以观察到如图 2.2 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]软骨组织工程软骨细胞分离方式的优化[J]. 邵博,占琼,龚忠诚,宁晓婷,杨萌,王玥,胡鑫,高芸竹,林兆全. 新疆医科大学学报. 2016(09)
[2]关节软骨中最基本的解剖功能结构:软骨单位（英文）[J]. 段王平,孙振伟,卫小春. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(24)
[3]改良大鼠下颌骨成骨细胞原代培养与鉴定[J]. 鄂玲玲,刘洪臣,吴霞,王东胜. 中华老年口腔医学杂志. 2007(04)
硕士论文
[1]碳酸酐酶1在关节炎异常钙化机制中的研究[D]. 郑亚冰.济南大学 2012
本文编号：3117375
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨关节炎病理学改变[6]
图1.2 zinc-ZIP8-MTF1信号通路在骨关节炎中的作用[11]Fig.1.2 zinc-ZIP8-MTF1 axis in osteoarthritis (OA)节炎（OA）是所有关节病中最常见的并且是导致残疾的主要原因。未开发出有效的用于OA的疾病缓解疗法。OA以软骨退变，滑膜炎症软骨下骨硬化为主要特征[73, 74]。OA发病机制是由合成代谢因子和分间的不平衡引起的，包括增加基质降解酶，如MMPs的产生和ADA促进软骨细胞的细胞外基质的降解，致使软骨细胞凋亡[12-14]，软骨基质降解酶中，MMP3，MMP13和ADAMTS5在OA软骨破坏中发挥研究证明，zinc-ZIP8-MTF1是实验性小鼠OA的一种发病机制[75]。Zn2+）涉及酶，核酸和蛋白质的合成过程，是体内必须的微量元素作为基质降解酶的结构成分，通过提供结构支架，例如以锌指和锌簇个通过提供多种蛋白质的活化剂或共激活剂[77]。有文献指出Zn2+是的关键因子[77]。事实上，Zn2+稳态的失衡与胚胎发育，免疫功能障疾病问题，并增加死亡率和疾病[78]。Zn2+稳态主要受膜转运蛋白
P0P4图 2.1 软骨细胞的形态特征（标尺：500 μm）Fig.2.1 Mophological characteristic of articular chondrocytes（Scale bar: 500 μm）2.4.2 II 型胶原免疫荧光染色鉴定II 型胶原作为软骨细胞的一种标记蛋白，可以用来鉴定软骨细胞。通过免疫荧光技术对 P1 细胞进行染色鉴定[93]。绿色荧光来确定标记蛋白，蓝色荧光来确定细胞核。在倒置显微镜下可以观察到如图 2.2 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]软骨组织工程软骨细胞分离方式的优化[J]. 邵博,占琼,龚忠诚,宁晓婷,杨萌,王玥,胡鑫,高芸竹,林兆全. 新疆医科大学学报. 2016(09)
[2]关节软骨中最基本的解剖功能结构:软骨单位（英文）[J]. 段王平,孙振伟,卫小春. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(24)
[3]改良大鼠下颌骨成骨细胞原代培养与鉴定[J]. 鄂玲玲,刘洪臣,吴霞,王东胜. 中华老年口腔医学杂志. 2007(04)
硕士论文
[1]碳酸酐酶1在关节炎异常钙化机制中的研究[D]. 郑亚冰.济南大学 2012
本文编号：3117375
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3117375.html
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