TGF-β1对Wnt/β-catenin信号通路在异氟醚后处理诱导大鼠脑保护机制中的调控作用

发布时间：2021-04-07 23:18

　　目的:通过建立大鼠大脑中动脉（MCAO）栓塞模型,观察Wnt/β-catenin信号通路在异氟醚（Isoflurane,ISO）后处理减轻脑缺血再灌注损伤中的作用,同时应用Wnt/β-catenin信号通路的特异性抑制剂DKK-1及TGF-β1/Smad3通路的相关抑制剂LY2157299、SIS3,探讨TGF-β1/Smad3通路对Wnt/β-catenin通路在异氟醚后处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的调控作用。方法:采用大脑中动脉栓塞法（middle cerebral artery occlusion,MCAO）缺血90min、再灌注24小时制备SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,异氟醚后处理组于再灌注时立即使用1 MAC（1.5%）异氟醚对其进行后处理60min。各抑制剂组在术前30min经腹腔或侧脑室注射不同抑制剂（Wnt通路抑制剂DKK-1、TGF-β1抑制剂LY2157299、Smad3抑制剂SIS3）。于再灌注24小时时评估大鼠的各项指标。用神经功行为学评分、TTC染色评估实验大鼠的神经功能损伤及脑梗死的程度;TUNEL凋亡染色判定大鼠海马CA1区神经元细胞的凋亡程度;N... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同药物处理对脑缺血再灌注损伤大鼠海马CA1区神经元损伤的影响

图 3 不同药物处理对脑缺血再灌注损伤大鼠海马 CA1 区神经元细胞凋亡的影响注：与 S 组相比，#P＜0.05；与 M 组相比，$P＜0.05；与 M+I 组相比，&P＜0.055. β-catenin、CyclinD1 在不同药物处理及脑缺血再灌注损伤后在各组海马CA1 区的表达如图 4 所示，再灌注 24 h 之后，与 S 组比较，M 组损伤侧海马 CA1 区 β-catenin、CyclinD1 的表达降低（P<0.05）；M+I 组较 M 组 β-catenin、CyclinD1 的表达明显升高（P<0.05）；应用 Wnt/β-catenin 通路抑制剂 DKK-1 之后，损伤侧海马 CA1 区 β-catenin、CyclinD1 的表达降低（P<0.05）。

4 β-catenin、CyclinD1 在不同药物处理及脑缺血再灌注损伤后在各组海马 CA1 区的表 组相比，#P＜0.05，##P＜0.05；与 M 组相比，$P＜0.05，$$P＜0.05；与 M+I 组相比，&P＜0.05，&t/β-catenin 通路相关蛋白及 Caspase3 蛋白在异氟醚后处理脑缺血伤后的表达（Western blot、qRT-PCR）图 5 所示，Western blot 显示：与 S 组相比，M 组 Wnt/β-catenin 通路相关白 Wnt3a、β-catenin 以及 VEGF、CyclinD1 的表达降低（P<0.05），负性K-3β 及凋亡蛋白 Caspase3 的表达则增多（P<0.05）；与 M 组比较，M+I 组 nin 以及 VEGF、CyclinD1 的表达均明显升高（P<0.05），GSK-3β 与 Casp低（P<0.05）。同样是提前给予 Wnt/β-catenin 通路抑制剂 DKK-1 处理，后处理的 M+D+I 组其 Caspase3 的表达较未行异氟醚后处理的 M+D 组明.05）。


本文编号：3124382