血清外泌体促小鼠烫伤创面愈合的作用研究

发布时间：2021-04-09 07:53

　　目的:1.确认外泌体是否会促进烫伤创面的愈合。2.初步探讨外泌体促进烫伤创面愈合的相关机制。方法:1.采用试剂盒法分离外泌体,并通过免疫印迹法检测外泌体标志蛋白,透射电镜观察外泌体形态及纳米颗粒跟踪分析仪测定外泌体粒径。2.选取NIH小鼠建立皮肤深二度烫伤模型,通过HE染色判断造模是否成功。3.烫伤皮肤皮下注射血清外泌体,定期测量各组小鼠烫伤区域面积,评估外泌体的疗效。4.取烫伤部位皮肤进行HE染色,观察皮肤组织的病理变化。5.荧光标记法观察外泌体能否进入皮肤组织细胞。6.MTT法检测血清外泌体对成纤维细胞增殖的影响。7.流式细胞术检测血清外泌体对表皮细胞凋亡的影响。8.细胞划痕实验检测血清外泌体对表皮细胞迁移的影响。9.蛋白免疫印迹检测烫伤组,正常组和外泌体组皮肤的AKT磷酸化水平。10.细胞免疫荧光检测血清外泌体对血管内皮细胞VEGF的影响。11.实时荧光定量PCR（RT-q PCR）检测血清外泌体对VEGF m RNA的影响。结果:1.试剂盒法分离的的大鼠血清外泌体均表达外泌体标志蛋白:CD63,HSP70;粒径均一性良好,均127nm左右,呈双层膜结果。2.成功建立小鼠深二度皮... 

【文章来源】：广东药科大学广东省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

VEGF通过P13K/AKT通路介导血管生成示意图

图 3.1 大鼠血清外泌体电镜3.1.2 血清外泌体粒径检测结果纳米颗粒跟踪分析技术（简称：NTA），是之一，常被用来检测外泌体的粒径。使用 NTA体的粒径大小，如图 3.2 所示，无论是差速超速鼠血清外泌体，粒径出峰值都在 127nm 左右,且果显示试剂盒法提取的血清外泌体粒径符合外

图 3.1 大鼠血清外泌体电镜下形态学结果3.1.2 血清外泌体粒径检测结果纳米颗粒跟踪分析技术（简称：NTA），是近年来新兴之一，常被用来检测外泌体的粒径。使用 NTA 分析试剂盒体的粒径大小，如图 3.2 所示，无论是差速超速离心法还是鼠血清外泌体，粒径出峰值都在 127nm 左右,且峰形尖锐，果显示试剂盒法提取的血清外泌体粒径符合外泌体的定义标

【参考文献】：
期刊论文
[1]间充质干细胞来源的Exosome对神经损伤的保护作用[J]. 魏俊吉,陈云飞,薛春玲,马百涛,沈雅梅,关健,包新杰,吴昊,韩钦,王任直,赵春华.  中国医学科学院学报. 2016(01)



本文编号：3127241