力学敏感MicroRNA-199a-5p在终板软骨细胞退变中的作用

发布时间：2021-04-25 12:19

　　目的:通过体外构建终板软骨细胞牵张力诱导退变模型,探讨力学敏感MicroRNA-199a-5p在牵张力条件下诱导终板软骨细胞退变中的调控机制。方法:收集因年轻颈椎骨折患者在我科接受颈椎手术的终板软骨组织,通过FX-5000细胞应变加载系统应用在体外构建体终板软骨细胞牵张力模型（10%伸长率、0.5Hz、12h/d）;采用MicroRNA芯片检测技术检测牵张力作用后差异MicroRNAs表达情况,并通过Realtime RT-PCR验证芯片结果;采用Targetscan、Miranda、miRbase、mirdb四种生物学软件分别预测差异表达MicroRNAs靶基因;选取目标MicroRNA-199a-5p进行动物体外实验,细胞染色观察牵张力刺激前后软骨细胞的表型;鬼笔环肽染色用于检测牵张力刺激后细胞骨架的改变情况,细胞增殖和凋亡情况分别采用AlamarBlue法、流式细胞术方式检测;双荧光素酶报告基因方法验证MicroRNA-199a-5p对IKBKB靶基因的直接作用;分别通过采用Realtime RT-PCR和western blot方法检测过表达（mimic）和抑制（inhibit... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料（资料、内容）与方法
    1.研究内容
    2.材料与方法
    3.统计学处理
结果
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-140-5P参与调控颈椎软骨终板退变[J]. 程细高,贾惊宇,吴添龙,李健,张磊磊,殷明.  南昌大学学报(医学版). 2014(05)
[2]兔椎体软骨终板血管芽增龄性变化[J]. 徐宏光,陈小虎,王弘,王凌挺,陈学武.  中华骨科杂志. 2011 (04)
[3]阻断软骨终板营养对终板软骨细胞影响的实验研究[J]. 徐宏光,陈学武,卢林明,刘平,夏良政.  皖南医学院学报. 2008(01)



本文编号：3159375