亚低温干预下神经干细胞RhoA/ROCK通路研究

发布时间：2021-04-28 11:33

　　目的:亚低温治疗可以增加脊髓对缺血、缺氧的耐受性,降低免疫反应及炎症反应,减少自由基的产生。大量的动物及临床实验都表明,亚低温可以促进急性脊髓损伤神经功能的恢复,改善预后。RhoA/ROCK信号通路作为神经轴突生长的“分子开关”。RhoA选择性抑制剂C3以及ROCK抑制剂Y-27632、法舒地尔在动物实验中研究表明,阻断RhoA/ROCK信号通路,可以减少神经元的凋亡,促进轴突生长,改善大鼠肢体运动功能。目前还没有关于亚低温与RhoA/ROCK信号通路关系的研究报告,本实验通过亚低温干预神经干细胞生长环境,通过检测RhoA/ROCK信号通路上相关基因、蛋白及离子浓度变化,初步推测亚低温与RhoA/ROCK信号通路关系,为治疗脊髓损伤提供更多切入点。方法:从Wistar胎鼠脑组织中提取神经干细胞,经过传代培养后,获得神经干细胞悬液。利用自行设计的液压冲击装置:用三通管将压力表、注射器、培养瓶三者连接起来,摆锤打击注射器一端,压力通过注射器内的液体传递到培养瓶中培养细胞层,造成细胞损伤,通过上述原理制备大鼠神经干细胞液压损伤模型。将制备的大鼠神经干细胞液压冲击伤模型随机分为亚低温组和常温组... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、现状
    研究目的、方法
1 对象和方法
    1.1 实验对象与分组
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 神经干细胞的培养
        1.3.2 神经干细胞的鉴定
        1.3.3 神经干细胞的标记
        1.3.4 神经干细胞液压冲击伤模型制备及实验分组
    1.4 RhoA/ROCK信号通路相关检测
        1.4.1 神经干细胞内游离Ca~（2+）浓度的测定
        1.4.2 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgRmRNA的表达
        1.4.3 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgR蛋白的表达
        1.4.4 免疫荧光检测RhoA/ROCK阳性细胞数
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果
    2.1 神经干细胞形态及鉴定结果
    2.2 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgRmRNA的表达
    2.3 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgR蛋白的表达
    2.4 荧光显微镜观察RhoA/ROCK阳性细胞数
    2.5 细胞内钙离子浓度测定
3 讨论
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 亚低温及RhoA/ROCK信号通路在脊髓损伤中的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]Rho kinase:A new target for treatment of cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Qinghong Cui,Yongbo Zhang,Hui Chen,Jimei Li.  Neural Regeneration Research. 2013(13)
[2]1264例住院脊髓损伤患者的流行病学分析[J]. 郝春霞,李建军,周红俊,康海琼,栗绍强,刘根林,郑樱,卫波,张缨,王一吉.  中国康复理论与实践. 2007(11)



本文编号：3165406