移植由成纤维细胞重编程神经元和丝纤维支架构成的神经网络促进脊髓损伤修复

发布时间：2021-05-15 17:26

　　脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）是一种中枢神经系统损伤,可导致严重的运动、感觉和自主功能障碍。由于受损的神经元难以再生和修复,尚无有效治疗脊髓损伤的方法。随着科学技术及临床医学的发展,细胞移植成为促进脊髓损伤修复的潜在方法。移植后的细胞能够通过多种机制发挥功效,包括神经保护、免疫调节、促进轴突萌发和/或再生以及促进髓鞘再生等。然而,受到损伤部位恶劣微环境的影响,移植细胞的存活及功能的发挥成为临床治疗脊髓损伤的亟待解决的难题。支架和细胞是组织工程的两大构成要素。近年来,生物材料被广泛应用于神经系统损伤修复,以改善微环境,促进移植细胞的存活。因此,为移植细胞提供结构和功能支持的生物支架有利于神经损伤的有效修复。有研究表明,丝素蛋白纤维移植到损伤部位可改善受损微环境,促进神经纤维再生,而不引起炎症反应,是神经再生医学组织工程的理想选择。本实验室前期研究表明,丝素蛋白纤维对神经类细胞具有良好的生物相容性,为细胞提供丰富的粘附位点。将其设计成更接近体内环境的多孔三维结构有助于神经细胞迁移、增殖、分化以及损伤部位的神经纤维再生。本实验中使用的三维丝纤维（three-dime... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
序言
材料与方法
    1. 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 基本试剂
        1.3 实验仪器
        1.4 主要试剂配制
    2. 实验方法
        2.1 大鼠皮肤成纤维细胞的原代培养、传代及冻存
        2.2 3D-SF支架的制备
        2.3 化学诱导RDFs重编程为神经元
        2.4 细胞免疫荧光染色(以Tubb3为例)
        2.5 CCK-8检测细胞增殖
        2.6 细胞凋亡检测
        2.7 大鼠脊髓损伤模型制备以及神经网络的移植
        2.8 脊髓组织准备
        2.9 组织免疫荧光染色
        2.10 H&E染色
        2.11 Masson三色法染色
        2.12 BBB评分及45°网格攀爬实验
        2.13 统计学分析
实验结果
    1. 大鼠皮肤成纤维细胞(RDFs)的培养及鉴定
    2. 3D-SF与RDFs的生物相容性分析
        2.1 RDFs在3D-SF支架上的形貌分析
        2.2 3D-SF对RDFs增殖的影响
        2.3 3D-SF对RDFs调亡的影响
    3. 化学诱导RDFs重编程为神经元
    4. 神经网络(3D-SF-CiNs)的构建
    5. 神经网络促进大鼠脊髓损伤修复
        5.1 神经网络对SCI的组织学水平修复
        5.2 神经网络对SCI大鼠运动功能的修复
讨论
参考文献
结论
综述
    参考文献
本研究所获基金资助
缩略词表
致谢



本文编号：3188048