丝切蛋白（cofilin）在兔软骨细胞骨架及表型中作用的研究

发布时间：2021-05-15 19:04

　　目的研究丝切蛋白（cofilin）表达对软骨细胞表型及骨架的影响。方法通过siRNA及质粒转染分别构建cofilin低表达和高表达模型,对表达不同水平cofilin的软骨细胞进行细胞骨架及相关蛋白的检测,以研究cofilin对软骨细胞表型及骨架方面的影响。结果在软骨细胞中敲降cofilin蛋白后,用鬼笔环肽染色观察到软骨细胞骨架变得更为紧凑,在细胞延伸方向的肌动蛋白密度较对照组相比更为密集,同时软骨细胞中COLⅠ（Ⅰ型胶原蛋白）的表达水平稍增高（137.42%?25.14%）,结果无统计学意义（P>0.05）,而COLⅡ（II型胶原蛋白）表达水平明显降低（19.96%?14.59%）,结果有统计学意义（P<0.05）。在软骨细胞中过表达cofilin蛋白后,用免疫荧光染色观察到软骨细胞中细胞骨架的荧光强度较对照组稍暗,且分布稍广,COLⅠ表达降低（44.47%?21.67%）,结果有统计学意义（P<0.05）,而COLⅡ表达稍增高（116.16%?13.18%）,结果无统计学意义（P>0.05）。结论Cofilin蛋白对软骨细胞骨架具有重要的作用;Cofilin... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
1.引言
2.文献综述
    参考文献
3.技术路线图
4.材料和方法
    4.1 实验材料
        4.1.1 主要试剂
        4.1.2 主要实验器材与设备
    4.2 实验方法及步骤
        4.2.1 软骨细胞分离及培养
        4.2.2 质粒提取
        4.2.3 质粒抽提
        4.2.4 Cofilin高、低表达模型构建
        4.2.5 免疫荧光染色
        4.2.6 RT-PCR
        4.2.7 Western Blot
        4.2.8 数据分析
5.结果
    5.1 兔软骨细胞提取实验图
    5.2 细胞形态学观察
    5.3 低表达模型检测
        5.3.1 Cofilin低表达水平模型筛选
        5.3.2 Cofilin低表达水平模型cofilin蛋白检测
        5.3.3 Cofilin低表达水平模型COLⅠ、COLⅡ蛋白检测
    5.4 高表达模型检测
        5.4.1 Cofilin高表达水平模型cofilin蛋白检测
        5.4.2 Cofilin高表达水平模型COLⅠ、COLⅡ蛋白检测
    5.5 细胞骨架荧光强度分析
6.讨论
7.结论
8.展望
参考文献
中英文缩写词及对照表
在读期间发表的学术论文
在读期间参与发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]人髌下脂肪垫干细胞与骨关节炎软骨细胞间接共培养可促进其向软骨细胞分化[J]. 杨君君,陈诚,杨柳,宋雄波,谢文斌,黄术,刘宝荣.  细胞与分子免疫学杂志. 2017(02)
[2]软骨仿生基质体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞样细胞[J]. 吴江怡,王富友,杨柳,廖瑛.  细胞与分子免疫学杂志. 2015(11)
[3]调节软骨细胞骨架蛋白对成软骨表型的影响[J]. 宋雄波,吴江怡,黄术,陈诚,杨柳,刘宝荣.  第三军医大学学报. 2015(21)
[4]不同年龄兔软骨细胞培养和形态学研究[J]. 李昊.  山西职工医学院学报. 2008(01)

硕士论文
[1]间接共培养人髌下脂肪垫干细胞与骨关节炎软骨细胞的实验研究[D]. 杨君君.湖南师范大学 2018
[2]Rho/ROCK通路对应力调控成骨细胞Cofilin及成骨相关基因表达作用的研究[D]. 韩雨晨.第四军医大学 2015
[3]Cofilin信号通路在骨性关节炎发病机制中的作用研究[D]. 史野.长春中医药大学 2012



本文编号：3188177