地西他滨联合过继γδ T细胞输注治疗骨肉瘤的效应及机制

发布时间：2021-06-01 19:38

　　骨肉瘤是青少年最常见的原发恶性骨肿瘤。骨肉瘤的标准治疗包括新辅助治疗、手术和术后化疗。目前患者的5年生存率已经达到70%左右,但是对复发或发生肺转移的患者来说,治疗效果仍不理想。近年来,免疫疗法在治疗肿瘤中表现出令人满意的结果。过继细胞治疗（adoptive cell therapy,ACT）,作为免疫疗法的主要手段之一,在癌症治疗中得到了广泛的研究。γδT细胞是ACT理想的候选细胞,因为它容易获得并可以在体外无限数量地扩增。但是,针对骨肉瘤的过继γδT细胞治疗效果不佳。尽管在随后的临床前试验中使用了几种辅助方法来增强γδT细胞的细胞毒性作用,但结果并不令人满意。因此迫切需要找到一种新的安全的方法来解决这一问题。地西他滨（Decitabine,DAC）是一种FDA批准的去甲基化药物,不仅可以诱导肿瘤细胞死亡,而且具有免疫调节功能。重要的是,它增加了NKG2D配体（NKG2D ligands,NKG2DLs）在肿瘤上的表达,从而增强了NK细胞介导的细胞毒性作用。在本次实验中我们探究联合γδT细胞和地西他滨治疗骨肉瘤的可能性。地西他滨通过增强骨肉瘤细胞表面NKG2D配体的表达,包括主要组织... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

不同浓度DAC处理对人γδT细胞凋亡的影响

浙江大学硕士学位论文地西他滨对人γδT细胞凋亡和表型的影响6图1.1不同浓度DAC处理对人γδT细胞凋亡的影响图1.25uMDAC对人γδT细胞表型的影响

浙江大学硕士学位论文地西他滨去甲基化作用对骨肉瘤NKG2DLs表达及γδT细胞免疫应答的作用133.3结果3.3.1DAC预处理肿瘤可以提高γδT细胞对肿瘤的杀伤能力从图2.1可以看出，DAC或γδT细胞单独作用抑制HOS和U2OS生长的效果并不明显。而当DAC预处理肿瘤1天、2天、或者3天，可以显著提高γδT细胞杀伤效果。这说明DAC可以提高骨肉瘤细胞对γδT细胞介导的免疫杀伤的敏感性。图2.1检测γδT细胞杀伤DAC预处理肿瘤细胞效果的MTS细胞毒性实验3.3.2DAC可以提高HOS和U2OS细胞MICB和ULBP1表达先前的研究报道了NKG2DL-NKG2D轴在NK细胞和γδT细胞裂解肿瘤细胞中的作用[6,18]。此外，DAC治疗显著增加了急性髓细胞白血病患者中NKG2DLs的表达[14]。DAC是否也能增加骨肉瘤细胞中NKG2DLs的表达尚未研究。用5uMDAC处理骨肉瘤细胞（HOS和U2OS细胞）3天后，我们通过PCR和流式细胞术评估了骨肉瘤细胞NKG2DLs的表达。与PBS预处理的骨肉瘤细胞相比，MICB和ULBP1在DAC预处理的骨肉瘤细胞的表达提高了10倍以上，而其他NKG2DLs（MICA,ULBP2/3）的表达没有显著变化（图2.2B）。此外，PCR的结果与流式结果保持一致，说明DAC处理提高了骨肉瘤细胞MICB和ULBP1基因的转录（图2.2A）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Specific Antitumor Effects of Tumor Vaccine Produced by Electrofusion between Osteosarcoma Cell and Dendritic Cell in Rats[J]. Zhe Yu~(1,2) Qingyu Fan~1 Xinbao Hao~1 Hua Long~1 1 Center of Orthopedic Surgery,Orthopedics Oncology Institute of Chinese PLA,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,China..  Cellular & Molecular Immunology. 2004(06)



本文编号：3210027