MiR-1224-5p通过TGF-β1/Smad3通路影响瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭
发布时间：2021-06-06 09:01
瘢痕疙瘩是一种良性肿瘤,临床表现为异常的增生,超出创伤的范围,侵犯临近组织,不能自行消退。瘢痕疙瘩常发生于耳部、下颌部、前胸部、肩背部及四肢关节等部位。瘢痕疙瘩的特征是成纤维细胞过度增殖和胶原的过度生成,经常引起瘙痒、疼痛、外观不良及功能障碍。临床上虽然瘢痕疙瘩的治疗方式多样,如手术,激素局部注射和放疗等,但是瘢痕疙瘩的发病机制仍不明确,目前对瘢痕疙瘩发病机制的研究是急需解决的一大难题。MicroRNA（miRNA）是一类单链非编码小分子RNA,影响多种细胞生物过程,如增殖、凋亡、分化及细胞外基质的产生。迄今为止,研究已经发现了miRNA参与多种疾病的发生和发展,如结直肠癌,乳腺癌,肺癌,淋巴瘤和肝脏肿瘤等。越来越多的证据表明在一些炎症及皮肤肿瘤中的miRNA表达异常,包括瘢痕疙瘩。目前,国内外关于miRNA在瘢痕疙瘩发病机制中研究尚处于起步阶段。既往的研究发现miR-1224-5p在肿瘤发生中发挥重要作用,参与了细胞的增殖、凋亡。miRNA被发现在一些肿瘤中存在异常表达,例如直肠癌、胶质瘤、肺癌等,但其在瘢痕疙瘩发病中的具体作用尚不清楚。本研究拟通过在体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞中...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
倒置显微镜下观察成纤维细胞爬出情况
MiR-1224-5p 通过 TGF-β1/Smad3 通路影响瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭 第一部分2.1.2 细胞免疫化学鉴定情况将培养 2-4 代成纤维细胞进行波形蛋白（vimentin，vim）免疫荧光染色，镜下可见瘢痕疙瘩、正常成纤维细胞的胞浆发出亮绿色荧光，而细胞核无荧光。每张切片取 5 个高倍镜视野，可见胞质发出亮绿色荧光的为阳性细胞，计数 30 个细胞中阳性细胞的数目取平均值。3 次重复结果显示阳性率为 100%，可以证实原代培养的细胞为较高纯度的成纤维细胞，而非类上皮细胞（见图 1-2）。
图 1-3 qRT-PCR 实验检测 miR-1224-5p 在各组组织中 mRNA 水平表达量测比较 NS 组、KD 组 miR-1224-5p 组织水平表达量。结果：miR-1224-5p显低于 NS 组（*P＜0.05）（NS：正常皮肤组织组；KD：瘢痕疙瘩组） 实时荧光定量 PCR 验证 miR-1224-5p 在细胞中的表达荧光定量 PCR 检测 miR-1224-5p 在皮肤成纤维细胞中的表达，结肤成纤维细胞相比，miR-1224-5p 在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达.315±0.031 倍，表达量显著下降，其差异有统计学意义（P<0.01）（
【参考文献】：
期刊论文
[1]瘢痕疙瘩药物治疗研究进展[J]. 李周娜,朱莲花,方宇辉,金哲虎. 中国皮肤性病学杂志. 2016(02)
[2]咪喹莫特的临床应用新进展[J]. 王琨. 临床皮肤科杂志. 2016(01)
[3]手术切除和曲安奈德注射联合90Sr-90Y敷贴治疗瘢痕疙瘩的临床疗效观察[J]. 曹春育,帅茂圣,丁忠旗,陈斯泰,赵建林. 临床皮肤科杂志. 2015(12)
[4]microRNA的功能及其临床应用[J]. 张航,刘威,刘建军. 生物技术通讯. 2015(02)
[5]瘢痕疙瘩的细胞信号转导通路的研究进展[J]. 徐静静,李毅,宗宪磊,蔡景龙. 组织工程与重建外科杂志. 2014(05)
[6]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[7]两种方法治疗瘢痕疙瘩的前瞻性研究[J]. 孙玉凯,李中华,王海琴,芦昌慧,杨波,王一民. 山东大学学报(医学版). 2014(08)
[8]无针注射器局部注射复方倍他米松注射液治疗瘢痕疙瘩23例疗效观察[J]. 寿倍明. 现代医学. 2014(05)
[9]耳廓瘢痕疙瘩的综合治疗[J]. 黎柱杨,王春. 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志. 2014(02)
[10]醋酸曲安奈德局部注射联合手术切除治疗耳部瘢痕疙瘩[J]. 卢昊,雷泽源,刘婷,毛彤春,陈宇,李翔,樊东力. 局解手术学杂志. 2014(02)
本文编号：3214057
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
倒置显微镜下观察成纤维细胞爬出情况
MiR-1224-5p 通过 TGF-β1/Smad3 通路影响瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭 第一部分2.1.2 细胞免疫化学鉴定情况将培养 2-4 代成纤维细胞进行波形蛋白（vimentin，vim）免疫荧光染色，镜下可见瘢痕疙瘩、正常成纤维细胞的胞浆发出亮绿色荧光，而细胞核无荧光。每张切片取 5 个高倍镜视野，可见胞质发出亮绿色荧光的为阳性细胞，计数 30 个细胞中阳性细胞的数目取平均值。3 次重复结果显示阳性率为 100%，可以证实原代培养的细胞为较高纯度的成纤维细胞，而非类上皮细胞（见图 1-2）。
图 1-3 qRT-PCR 实验检测 miR-1224-5p 在各组组织中 mRNA 水平表达量测比较 NS 组、KD 组 miR-1224-5p 组织水平表达量。结果：miR-1224-5p显低于 NS 组（*P＜0.05）（NS：正常皮肤组织组；KD：瘢痕疙瘩组） 实时荧光定量 PCR 验证 miR-1224-5p 在细胞中的表达荧光定量 PCR 检测 miR-1224-5p 在皮肤成纤维细胞中的表达，结肤成纤维细胞相比，miR-1224-5p 在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达.315±0.031 倍，表达量显著下降，其差异有统计学意义（P<0.01）（
【参考文献】：
期刊论文
[1]瘢痕疙瘩药物治疗研究进展[J]. 李周娜,朱莲花,方宇辉,金哲虎. 中国皮肤性病学杂志. 2016(02)
[2]咪喹莫特的临床应用新进展[J]. 王琨. 临床皮肤科杂志. 2016(01)
[3]手术切除和曲安奈德注射联合90Sr-90Y敷贴治疗瘢痕疙瘩的临床疗效观察[J]. 曹春育,帅茂圣,丁忠旗,陈斯泰,赵建林. 临床皮肤科杂志. 2015(12)
[4]microRNA的功能及其临床应用[J]. 张航,刘威,刘建军. 生物技术通讯. 2015(02)
[5]瘢痕疙瘩的细胞信号转导通路的研究进展[J]. 徐静静,李毅,宗宪磊,蔡景龙. 组织工程与重建外科杂志. 2014(05)
[6]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[7]两种方法治疗瘢痕疙瘩的前瞻性研究[J]. 孙玉凯,李中华,王海琴,芦昌慧,杨波,王一民. 山东大学学报(医学版). 2014(08)
[8]无针注射器局部注射复方倍他米松注射液治疗瘢痕疙瘩23例疗效观察[J]. 寿倍明. 现代医学. 2014(05)
[9]耳廓瘢痕疙瘩的综合治疗[J]. 黎柱杨,王春. 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志. 2014(02)
[10]醋酸曲安奈德局部注射联合手术切除治疗耳部瘢痕疙瘩[J]. 卢昊,雷泽源,刘婷,毛彤春,陈宇,李翔,樊东力. 局解手术学杂志. 2014(02)
本文编号：3214057
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