PRMT2联合Tamoxifen增加乳腺癌细胞死亡及其相关机制的研究

发布时间：2021-07-03 19:03

　　目的:研究蛋白质精氨酸甲基转移酶2（PRMT2）在乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231中对细胞死亡率的影响,为乳腺癌病人内分泌疗法提供新的治疗思路。方法:以体外培养的MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞为研究对象,通过将PRMT2基因进行敲低或高表达处理,研究PRMT2在TAM诱导乳腺癌细胞凋亡过程中的作用及其相关机制。实验主要分为四个部分:1.分别将乳腺癌细胞PRMT2进行高表达和低表达处理,通过流式细胞术检测PRMT2的不同表达联合TAM对乳腺癌细胞死亡的影响。2.通过细胞周期实验检测高表达PRMT2对乳腺癌细胞周期的影响。3.利用蛋白质免疫印迹法,从蛋白水平分析PRMT2高表达和低表达对乳腺癌细胞ER-α36、Akt及P-Akt表达的影响。4.通过免疫组化实验,明确PRMT2和ER-α36在乳腺癌细胞中的表达情况及其相互关系。结果:1.流式细胞学检测结果提示:与对照组MCF-7-NC细胞相比较,MCF-7-sh PRMT2细胞经0、7.5μmol/L TAM处理36小时后,细胞死亡率明显降低,有统计学意义（P<0.0001）。同样,在相同浓度TAM处理MDA-MB... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PRMT2表达变化对抗雌激素药物TAM对乳腺癌细胞死亡率的影响

图 2 PRMT2 高表达对 MDA-MB-231 细胞周期的影响。MDA-MB-231-NC 和 MDA-MB-231-PRMT2 细胞分别用 0μM、5μM TAM 处理 36h，然后收集、洗涤、PI 细胞染色、流式细胞分析。4.3 PRMT2 能抑制 ER-α36 的表达及其 PI3K/Akt 信号途径

RMT2 表达变化对相关蛋白表达的影响。用浓度为 5μg/ml 的四环素诱导乳腺癌细胞 MDA-MB-231-PRMT2、MDA-MB-231PRMT2 的表达增加对 ER-α36、P-Akt、Akt 的影响；以慢病毒为载体的 shRNA 表 MCF-7 细胞 PRMT2，获得 MCF-7-shPRMT2 细胞，以 MCF-7-NC 细胞作为对照PRMT2 的表达下降对 ER-α36、P-Akt、Akt 的影响；目的蛋白均以 β-actin 为内参PRMT2 与 ER-α36 在乳腺癌组织中表达的相关性为了进一步研究 PRMT2 与 ER-α36 在乳腺癌组织中相互表达的关系，过采用组织芯片技术(US Biomax;BR1921)，对 160 例乳腺癌患者进行了片分析。结果表明，大多数乳腺癌患者肿瘤组织均表达 PRMT2 和（或36。其中，PRMT2 主要表达于细胞核，而 ER-α36 主要表达于细胞膜质中（图 4A）。通过对该 160 例乳腺癌患者进行组织切片并进行统计发现，P 值大于 0.05，提示 PRMT2 和 ER-α36 的在乳腺癌组织中的表达相关性(r=-0.024；P=0.765），与细胞观察结果不一致（图 4B）

【参考文献】：
期刊论文
[1]新型雌激素受体ER-α36与乳腺癌[J]. 廉馨,史丹,李洪艳.  中国生物化学与分子生物学报. 2015(01)



本文编号：3263168