白介素37抑制破骨细胞分化和缓解炎性骨质破坏的研究

发布时间：2021-07-08 11:26

　　目的:骨感染是一种急性或慢性的骨组织炎症反应,以骨质破坏、骨重建紊乱和难控性炎性反应为表现。白介素37（IL-37）是机体重要的一类抗炎因子,但生理表达量很低。我们在骨感染合并骨质破坏的临床样本中检测到了高表达的IL-37蛋白。因此,我们的研究目的就是探究这一重要的抗炎因子在感染相关炎性骨质破坏中发挥了何种作用,从而为骨感染的治疗寻找新的靶点。方法:通过对骨及软组织感染标本的收集,检测其中IL-37的表达量。借助细菌内毒素脂多糖（LPS）构建小鼠炎性骨质破坏模型,研究重组人IL-37蛋白的动物体内活性。利用RANKL和LPS分别构建体外生理、炎性状态下破骨细胞分化模型,探究IL-37在体外对该生物学过程的影响,探讨部分分子机制。结果:通过免疫组化在感染骨及软组织标本中检测到高表达的IL-37蛋白。利用重组人IL-37蛋白（4μg/天）可以缓解LPS（100μg/天）所致小鼠颅骨和四肢骨的骨质破坏,颅骨切片TRAP染色显示破骨细胞的数量较对照组减少。在生理状态和炎性状态两种破骨细胞体外分化的途径中,IL-37（200 ng/mL）均表现出抑制效果,该作用不仅依赖于降低感染相关的炎性因子（... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

骨感染临床样本中高表达IL-37蛋白A.四组样本分别来自于非感染性骨折和感染性骨髓炎

行皮下注射。每只小鼠于皮下行LPS（100 μg/day）注射，连续注射7天。所有小鼠在陆军军医大学实验动物中心饲养。手术过程如图2。图 2 颅部皮下注射示意图术后处理：每隔 24h 后予以皮下给药处理，术后给予唤醒及保持温度等处理，操作前后给予碘伏伤口消毒。小鼠同一条件单笼饲养，可自由活动、进食、水。连续 7天每日观察小鼠活动情况。第 8 天，麻醉下脱颈处死小鼠，去除颈部及双下肢毛发。小心剪开皮肤、皮下层，“工”型剪开头颈部皮肤，小心解剖注意保护颅骨完整性，取下双侧股骨，去除骨性结构外软组织。沿颅骨冠状方向取样标本，以 4%多聚甲醛固定 24 小时后与部分下肢骨标本一同置于 10% EDTA 溶液中脱钙 2-3w，另一部分下肢标本置于 70%乙醇中保存备影像学检测。3.2.4.2 全颅骨 TRAP 染色将处理完毕的小鼠颅骨标本予以 PBS 反复清洗后置于 4%多聚甲醛中，室温固定

陆军军医大学硕士学位论文 实验结果3.3.1 全颅骨 TRAP 染色实验结果抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP，tartrate resistant acid phosphatase)是破骨细胞特也是破骨细胞重要的组织化学标志。如下图所示，随着 LPS 注射天数的增加骨骨缝处的 TRAP 染色范围逐渐增加，说明 LPS 的局部局部注射导致骨缝间的形成增加。


本文编号：3271475