布洛芬减弱IL-1β引起的兔软骨细胞肌动蛋白重组及机制研究
发布时间：2021-07-27 07:06
骨性关节炎（osteoarthritis,OA）是一种由多种原因导致的以关节软骨破坏,软骨下骨硬化以及滑膜炎症为病理特征的慢性退变性关节疾病,随着疾病的进展,最终导致关节不可逆性破坏。OA发病率高,65岁以上的人群患病率超过50%,随着我国人口老龄化的逐渐加重,OA的发病率更是会逐年上升,这将成为我国中老年人致残的重要病因。尽管对OA进行了大量的研究,但是其发病机制仍然不是很清楚。目前普遍认同的观点是关节内的炎性环境对OA的发生和发展起着重要的作用。白细胞介素-1β（interleukin-1β）作为OA进展过程中重要的炎性因子,不仅能增加多种促炎因子的分泌,而且还能促进一氧化氮（nitric oxide,NO）、血小板反应蛋白酶（thrombospondin motifs,ADAMTS）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）、前列腺素E2（prostaglandin,PGE2）等多种分解代谢因子的分泌,造成软骨细胞外基质的破坏。此外,我们发现IL-1β还能激活软骨细胞RhoA信号,使软骨细胞内纤维肌...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：82 页
【学位级别】：博士
【图文】：
布洛芬对软骨细胞的计量效应（A）不同浓度布洛芬处理软骨细胞24小时后细胞凋亡情况
陆军军医大学博士学位论文—50—3.2布洛芬对IL-1β引起的NO改变的影响实验结果显示：IL-1β处理组的NO含量增多了100%，显著高于空白对照组(P<0.01)。预先用布洛芬处理软骨细胞2小时后再加入IL-1β（IL-1β+布洛芬组）与单独用IL-1β处理相比（IL-1β组），前者NO含量降低了50%（P<0.01），且与空白组相比，二者NO含量无明显统计学差异（P>0.05）。结果说明IL-1β引起软骨细胞产生NO增加，同时布洛芬对IL-1β引起的NO增加有较强的抑制作用。图2Griess实验检测各组培养基NO含量（**P<0.05,n=3）。3.3布洛芬对IL-1β引起的PGE2改变的影响实验结果显示：与对照相比，IL-1β组的培养基PGE2含量增多了32%(P<0.01)。而IL-1β+布洛芬组与IL-1β组相比，PGE2含量降低了15%（P<0.05）。这说明IL-1β引起软骨细胞合成PGE2明显增加，同时布洛芬对IL-1β引起PGE2的增加具有抑制作用。
陆军军医大学博士学位论文—51—图3ELISA实验检测各组培养基PGE2含量（*P<0.05,**P<0.01,n=3）。3.4布洛芬对IL-1β引起的软骨细胞F-actin改变的影响通过软骨细胞骨架鬼笔环肽染色，我们发现：与对照组相比，IL-1β组软骨细胞F-actin更为紧实、密集、荧光强度更强、应力纤维（stressfiber）清晰可见，而IL-1β+布洛芬组软骨细胞未有上述情况发生（图4A）。我们应用ImageJ图像处理软件定量F-actin的平均荧光密度，结果显示：IL-1β处理的软骨细胞F-actin的平均荧光密度明显高于对照组（P<0.01），而IL-1β+布洛芬组与IL-1β组相比，前者F-actin平均荧光强度低于后者（P<0.05）（图4B）。肌动蛋白在真核细胞中有两种存在形式,即G-actin和F-actin，二者的总量在细胞中相对恒定。因此，我们应用Westernblot对软骨细胞内F-actin与G-actin的比值（F-actin/G-actin）进行测定。结果显示：与对照相比，IL-1β组的软骨细胞F-actin/G-actin明显高于对照组的比值，增加了接近50%（P<0.05）。而IL-1β+布洛芬组与IL-1β组相比，前者减少了约30%（P<0.05），同时前者与对照组相比无明显统计学差异（P>0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肌动蛋白结构及生物学功能的研究进展[J]. 刘妍,潘丽,秦贵信. 中国畜牧杂志. 2020(01)
[2]RhoA/ROCK信号通路相关疾病的研究进展[J]. 刘建兵,刘敏丽. 海南医学院学报. 2019(06)
[3]氧化石墨烯促进HaCaT细胞迁移及初步机制研究[J]. 杨涛,周代君,王淞,王颖,胡晓红,张小容,贺伟峰,夏合生,邢孟秋,吴军,罗高兴. 第三军医大学学报. 2018(10)
[4]淫羊藿苷对IL-1β诱导的炎症性软骨细胞表型与代谢的影响[J]. 李安琪,刘益杰,冯伟,何东仪,张增乔,胡笑燊,杨松滨,张彩. 上海中医药杂志. 2018(02)
[5]F-actin重构对树突状细胞形态和功能影响的研究进展[J]. 刘鲜梅,曾柱,姚伟娟. 中国免疫学杂志. 2018(01)
[6]Rho鸟苷三磷酸酶调节细胞迁移中细胞骨架结构的研究进展[J]. 宋厚盼,陈昫,李茹柳. 广州中医药大学学报. 2013(02)
[7]MCF-7细胞他莫昔芬耐药过程中F-actin细胞骨架的重构促进细胞迁移[J]. 李振华,涂刚,李维东,莫志强,杨光伦,罗浩军,柳满然. 第三军医大学学报. 2013(14)
[8]RhoA/ROCK信号通路对软骨细胞的影响[J]. 张海翔,王宸. 国际骨科学杂志. 2012(05)
[9]Rho蛋白与细胞骨架调节的细胞运动[J]. 曹文枫,孙保存. 中国肿瘤临床. 2009(14)
[10]中老年人群骨关节炎的流行病学特征[J]. 李宁华. 中国临床康复. 2005(38)
硕士论文
[1]磷酸化ATM通过调节细胞骨架F-actin重塑增强肺癌转移的作用研究[D]. 史远远.厦门大学 2018
本文编号：3305338
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：82 页
【学位级别】：博士
【图文】：
布洛芬对软骨细胞的计量效应（A）不同浓度布洛芬处理软骨细胞24小时后细胞凋亡情况
陆军军医大学博士学位论文—50—3.2布洛芬对IL-1β引起的NO改变的影响实验结果显示：IL-1β处理组的NO含量增多了100%，显著高于空白对照组(P<0.01)。预先用布洛芬处理软骨细胞2小时后再加入IL-1β（IL-1β+布洛芬组）与单独用IL-1β处理相比（IL-1β组），前者NO含量降低了50%（P<0.01），且与空白组相比，二者NO含量无明显统计学差异（P>0.05）。结果说明IL-1β引起软骨细胞产生NO增加，同时布洛芬对IL-1β引起的NO增加有较强的抑制作用。图2Griess实验检测各组培养基NO含量（**P<0.05,n=3）。3.3布洛芬对IL-1β引起的PGE2改变的影响实验结果显示：与对照相比，IL-1β组的培养基PGE2含量增多了32%(P<0.01)。而IL-1β+布洛芬组与IL-1β组相比，PGE2含量降低了15%（P<0.05）。这说明IL-1β引起软骨细胞合成PGE2明显增加，同时布洛芬对IL-1β引起PGE2的增加具有抑制作用。
陆军军医大学博士学位论文—51—图3ELISA实验检测各组培养基PGE2含量（*P<0.05,**P<0.01,n=3）。3.4布洛芬对IL-1β引起的软骨细胞F-actin改变的影响通过软骨细胞骨架鬼笔环肽染色，我们发现：与对照组相比，IL-1β组软骨细胞F-actin更为紧实、密集、荧光强度更强、应力纤维（stressfiber）清晰可见，而IL-1β+布洛芬组软骨细胞未有上述情况发生（图4A）。我们应用ImageJ图像处理软件定量F-actin的平均荧光密度，结果显示：IL-1β处理的软骨细胞F-actin的平均荧光密度明显高于对照组（P<0.01），而IL-1β+布洛芬组与IL-1β组相比，前者F-actin平均荧光强度低于后者（P<0.05）（图4B）。肌动蛋白在真核细胞中有两种存在形式,即G-actin和F-actin，二者的总量在细胞中相对恒定。因此，我们应用Westernblot对软骨细胞内F-actin与G-actin的比值（F-actin/G-actin）进行测定。结果显示：与对照相比，IL-1β组的软骨细胞F-actin/G-actin明显高于对照组的比值，增加了接近50%（P<0.05）。而IL-1β+布洛芬组与IL-1β组相比，前者减少了约30%（P<0.05），同时前者与对照组相比无明显统计学差异（P>0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肌动蛋白结构及生物学功能的研究进展[J]. 刘妍,潘丽,秦贵信. 中国畜牧杂志. 2020(01)
[2]RhoA/ROCK信号通路相关疾病的研究进展[J]. 刘建兵,刘敏丽. 海南医学院学报. 2019(06)
[3]氧化石墨烯促进HaCaT细胞迁移及初步机制研究[J]. 杨涛,周代君,王淞,王颖,胡晓红,张小容,贺伟峰,夏合生,邢孟秋,吴军,罗高兴. 第三军医大学学报. 2018(10)
[4]淫羊藿苷对IL-1β诱导的炎症性软骨细胞表型与代谢的影响[J]. 李安琪,刘益杰,冯伟,何东仪,张增乔,胡笑燊,杨松滨,张彩. 上海中医药杂志. 2018(02)
[5]F-actin重构对树突状细胞形态和功能影响的研究进展[J]. 刘鲜梅,曾柱,姚伟娟. 中国免疫学杂志. 2018(01)
[6]Rho鸟苷三磷酸酶调节细胞迁移中细胞骨架结构的研究进展[J]. 宋厚盼,陈昫,李茹柳. 广州中医药大学学报. 2013(02)
[7]MCF-7细胞他莫昔芬耐药过程中F-actin细胞骨架的重构促进细胞迁移[J]. 李振华,涂刚,李维东,莫志强,杨光伦,罗浩军,柳满然. 第三军医大学学报. 2013(14)
[8]RhoA/ROCK信号通路对软骨细胞的影响[J]. 张海翔,王宸. 国际骨科学杂志. 2012(05)
[9]Rho蛋白与细胞骨架调节的细胞运动[J]. 曹文枫,孙保存. 中国肿瘤临床. 2009(14)
[10]中老年人群骨关节炎的流行病学特征[J]. 李宁华. 中国临床康复. 2005(38)
硕士论文
[1]磷酸化ATM通过调节细胞骨架F-actin重塑增强肺癌转移的作用研究[D]. 史远远.厦门大学 2018
本文编号：3305338
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3305338.html
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