探究雄激素对烧烫伤小鼠愈合过程中毛发及毛囊干细胞增殖的影响

发布时间：2021-07-28 16:16

　　目的初步探究双氢睾酮对烧烫伤小鼠愈合过程中毛发和毛囊的影响作用筛选出合适的双氢睾酮浓度,用免疫荧光标记法检测毛囊干细胞在烧烫伤愈合过程中的增殖、分化和迁移的过程。方法在体毛囊培养,不同浓度双氢睾酮皮下注射烧烫伤小鼠,分别取毛干电镜扫描观察,利用显微外科解剖技术,分离创口皮肤,OCT包埋,HE染色观察不同浓度双氢睾酮注射后毛囊数目及形态,再利用EdU及CD200免疫荧光染色观察,双氢睾酮注射后烧烫伤小鼠皮肤愈合过程中毛囊干细胞的增殖、分化、迁移过程。结果通过试验发现,不同浓度雄激素对烧烫伤小鼠愈合过程中毛干毛小皮的影响不明显,而对毛囊的影响作用明显。一定浓度范围的雄激素中,筛选出7.5 mg/kg·d双氢睾酮对烧烫伤小鼠皮肤愈合过程中毛囊抑制作用明显。EdU细胞增殖检测发现7.5 mg/kg·d双氢睾酮可抑制细胞的增殖,使得毛囊萎缩。干细胞标记物CD200免疫荧光显示,CD200阳性毛囊干细胞主要集中在毛囊外根鞘隆突部;同时7.5 mg/kg·d双氢睾酮可抑制CD200阳性毛囊干细胞的表达。结论一定浓度的双氢睾酮对烧烫伤小鼠愈合过程中毛囊起抑制作用,使愈合过程中生长期毛囊减少,毛囊变细萎... 

【文章来源】：塔里木大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

毛囊结构示意图

塔里木大学硕士学位论文第2章雄激素对烧烫伤小鼠背部毛干的影响142.2试验方法2.2.1获取标本及保存方法利用不同浓度雄激素（0mg/kg·d、5mg/kg·d、7.5mg/kg·d、10mg/kg·d）皮下注射烧烫伤雌性小鼠，分别于第1天、第7天、第14天、第21天、第28天取样，断颈法处死烧烫伤雌性小鼠，操作过程中严格遵循动物伦理保护法，将小鼠于75%酒精溶液中消毒60s，随即转移至超净工作台中，利用显微外科剪分离乳鼠背部烧烫伤创口，距离烧烫伤创缘约0.3㎝，并将游离创缘皮片转移至外科解剖显微镜下，利用外科显微镊分离出完整的创缘周围毛干，收集后编号记录。冷冻保存于-20℃冰箱中备用。图2-1试验材料获取过程示意图Fig2-1.Schematicdiagramofexperimentalmaterialacquisitionprocess注：图2-1毛干及皮片获取过程示意图：此过程先分离皮片，再修剪毛干，分别保存备用。Note:Fig2-1.Sketchofhairshaftandfollicleacquisitionprocess:Inthisprocess,theskinpiecesareseparatedfirst,andthenthehairshaftsaretrimmedandstoredseparately.2.2.2扫描电镜观察将保存的编号记录的毛干取出，在塔里木大学分析测试中心室温下晾干5min，用100%丙酮冲洗5min，然后晾干，显微镊取干燥后的毛干，借助导电胶固定到样品台上，后进入离子溅射仪进行镀金，喷涂合适厚度的金膜导电层。导

塔里木大学硕士学位论文第3章雄激素对烧烫伤昆明小鼠背部毛囊的影响24图3-1不同浓度雄激素皮下注射创伤小鼠愈合的过程Fig3-1Thehealingprocessofhypodermicandrogeninjectioninmouse注：图3-1（A1-D1）为不同浓度雄激素（5mg/kg·d、7.5mg/kg·d、10mg/kg·d、0mg/kg·d）皮下注射烧烫伤小鼠模型；图（A1-A5）为5mg/kg·d雄激素皮下注射烧烫伤小鼠于1、7、14、21、28d愈合情况；图（B1-B5）为7.5mg/kg·d雄激素皮下注射烧烫伤小鼠于1、7、14、21、28d愈合情况；图（C1-C5）为10mg/kg·d雄激素皮下注射烧烫伤小鼠于1、7、14、21、28d愈合情况；图（D1-D5）为0mg/kg·d雄激素皮下注射烧烫伤小鼠于1、7、14、21、28d愈合情况；Note:Fig3-1A1-D1wasasubcutaneousburnandscaldmousemodelwithdifferentconcentrationsofandrogens(5mg/kg·d,7.5mg/kg·d,10mg/kg·d,0mg/kg·d)；（A1-A5）showsthehealingofburnedmicewith5mg/kg·dandrogensubcutaneousinjectionon1,7,14,21,28days；(B1-B5)showsthehealingofburnedmicewith7.5mg/kg·dandrogensubcutaneousinjectionon1,7,14,1d7d14d21d28d

【参考文献】：
期刊论文
[1]5种鼠类针毛结构的扫描电镜分析[J]. 赵青,胡一中,鲍毅新,郑荣泉,周伟.  浙江师范大学学报(自然科学版). 2005(01)



本文编号：3308233