镁通过调控巨噬细胞极化影响间充质干细胞软骨分化的研究
发布时间：2021-07-29 07:52
[目的]镁合金被视为有应用前景的骨科植入材料,而且其植入后释放出的镁离子具有重要的免疫调节作用。本研究旨在检测硫酸镁对巨噬细胞极化和炎性细胞因子释放的作用,并进一步研究这种调节作用对骨髓间充质干细胞（BMSCs）软骨分化的影响,以及对软骨细胞增殖、迁移等功能的影响。我们希望我们的研究结果能够为镁合金在骨科的临床应用提供切实的理论基础。[方法]首先,我们用脂多糖（LPS）和干扰素-γ（IFN-γ）诱导巨噬细胞的M1型分化,并用白介素-4（IL-4）诱导巨噬细胞向M2型分化,采用不同浓度的硫酸镁作用于诱导分化过程中的巨噬细胞,通过流式细胞技术检测硫酸镁对巨噬细胞极化的影响。同时,我们通过ELISA和RT-qPCR检测硫酸镁影响巨噬细胞极化时,对其炎性细胞因子释放的影响。然后,我们将M1型极化的巨噬细胞培养基上清液加入到软骨诱导液中,通过micromass法培养hBMSCs得到细胞微球,对其进行组织学染色、糖胺聚糖（GAG）定量以及成软骨相关基因表达的检测,评价巨噬细胞释放的炎性细胞因子对hBMSCs软骨分化的影响。同时,通过上述方法我们检测硫酸镁调节的巨噬细胞介导的炎症反应对hBMSCs软...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
硫酸镁对巨噬细胞LDH释放的影响
图 1.2 硫酸镁对未极化的巨噬细胞表型的影响。图 1.2 Effects of magnesium sulfate on the polarization of non-activated macrophages.（A）巨噬细胞 CCR7（代表 M1 型细胞）表达的流式柱状图结果。（B）巨噬细胞 CD206（代表 M2 型细胞）表达的流式柱状图结果。（C）3 次平行试验得出的巨噬细胞 CCR7 和CD206 表达阳性率的统计结果。在 LPS 和 IFN-γ 刺激 1 天后，巨噬细胞的 CCR7 和 CD206 表达阳性率均大幅增加（图 1.3）。有趣的是，同时采用 5mM 硫酸镁处理细胞却可以抑制 LPS 和IFN-γ 的作用，表现在 CCR7 阳性率出现明显下降而 CD206 阳性率未出现明显改变（图 1.3）。硫酸镁浓度增加到 20mM 同样可以抑制巨噬细胞 CCR7 的表达，但其阳性率减少的比例低于 5 mM 和 10 mM 硫酸镁。由于 LPS 和 IFN-γ 造成的细胞死亡和损伤（如图 1.1 所示），和只用硫酸镁处理而未加 LPS 和 IFN-γ 刺激
硫酸镁对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞表型的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]New perspectives for articular cartilage repair treatment through tissue engineering: A contemporary review[J]. Giuseppe Musumeci,Paola Castrogiovanni,Rosalia Leonardi,Francesca Maria Trovato,Marta Anna Szychlinska,Angelo Di Giunta,Carla Loreto,Sergio Castorina. World Journal of Orthopedics. 2014(02)
[2]Up-regulation of Cartilage Oligomeric Matrix Protein Gene Expression by Insulin-like Growth Factor-Ⅰ Revealed by Real Time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction[J]. Hua TIAN~(1,2*) Ioannis STOGIANNIDIS~21 Department of Orthopaedics,Peking University Third Hospital,Beijing 100083,China;2 Coxa Hospital for Joint Replacement,Biokatu 6 b,Tampere 33101,Finland. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2006(10)
硕士论文
[1]DEC2和HIF-1α在骨肉瘤转移侵袭中的作用及分子机制[D]. 胡涂.上海交通大学 2015
本文编号：3308931
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
硫酸镁对巨噬细胞LDH释放的影响
图 1.2 硫酸镁对未极化的巨噬细胞表型的影响。图 1.2 Effects of magnesium sulfate on the polarization of non-activated macrophages.（A）巨噬细胞 CCR7（代表 M1 型细胞）表达的流式柱状图结果。（B）巨噬细胞 CD206（代表 M2 型细胞）表达的流式柱状图结果。（C）3 次平行试验得出的巨噬细胞 CCR7 和CD206 表达阳性率的统计结果。在 LPS 和 IFN-γ 刺激 1 天后，巨噬细胞的 CCR7 和 CD206 表达阳性率均大幅增加（图 1.3）。有趣的是，同时采用 5mM 硫酸镁处理细胞却可以抑制 LPS 和IFN-γ 的作用，表现在 CCR7 阳性率出现明显下降而 CD206 阳性率未出现明显改变（图 1.3）。硫酸镁浓度增加到 20mM 同样可以抑制巨噬细胞 CCR7 的表达，但其阳性率减少的比例低于 5 mM 和 10 mM 硫酸镁。由于 LPS 和 IFN-γ 造成的细胞死亡和损伤（如图 1.1 所示），和只用硫酸镁处理而未加 LPS 和 IFN-γ 刺激
硫酸镁对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞表型的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]New perspectives for articular cartilage repair treatment through tissue engineering: A contemporary review[J]. Giuseppe Musumeci,Paola Castrogiovanni,Rosalia Leonardi,Francesca Maria Trovato,Marta Anna Szychlinska,Angelo Di Giunta,Carla Loreto,Sergio Castorina. World Journal of Orthopedics. 2014(02)
[2]Up-regulation of Cartilage Oligomeric Matrix Protein Gene Expression by Insulin-like Growth Factor-Ⅰ Revealed by Real Time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction[J]. Hua TIAN~(1,2*) Ioannis STOGIANNIDIS~21 Department of Orthopaedics,Peking University Third Hospital,Beijing 100083,China;2 Coxa Hospital for Joint Replacement,Biokatu 6 b,Tampere 33101,Finland. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2006(10)
硕士论文
[1]DEC2和HIF-1α在骨肉瘤转移侵袭中的作用及分子机制[D]. 胡涂.上海交通大学 2015
本文编号：3308931
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3308931.html
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