BNIP3介导的自噬对角质形成细胞迁移的影响及其机制研究
发布时间：2021-08-16 13:55
研究背景BNIP3（Bcl-2 nineteen-kilodalton interacting protein 3）是一种单次跨膜的、仅含有非典型BH3结构域的Bcl-2家族蛋白,主要分布于线粒体外膜上,是一种低氧反应蛋白。近年来的研究表明BNIP3参与多种细胞生存、凋亡、分化等生物学行为的调节,在肿瘤的发生发展、心肌损伤与修复、脑缺血缺氧性损害等多种疾病模型中见诸报道。我们先前的研究表明,低氧微环境可诱导小鼠皮肤角质形成细胞BNIP3高表达,并对其迁移发挥正向调节作用。许多研究发现BNIP3对细胞自噬的调节作用,而自噬对细胞迁移的调控日益受到研究人员的关注。已有研究表明,BNIP3分布于人皮肤角质形成细胞并对其稳态及分化具有调节作用,BNIP3分布的区域可见自噬水平的上调。因此,我们推测BNIP3介导的自噬可能调节对角质形成细胞的迁移,在创面再上皮化中发挥重要作用。自噬最初是基于其包裹细胞质和细胞器的双层膜超微结构进行描述的,这种双层膜结构被称为自噬体。该过程由两种复合物的形成触发,即ULK1复合物和PIK3C3/VPS34复合物,其中含有Atg14L和Beclin 1。这些复合物位...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
创面愈合过程中创缘表皮层BNIP3及自噬水平的变化（免疫荧光）
36图 3-1 低氧条件下角质形成细胞自噬水平的变化（Western Blot 法）(A) HaCaT cells were exposed to hypoxia (2%) and incubated for the indicated times, and total proteinswere harvested for detection of autophagy markers (LC3, P62, Atg5, Atg7, Atg16L1, Beclin-1, andp-ULK1) via Western blotting. GAPDH was used as the loading control. (B-H) WB results werequantitatively analyzed. Data were shown as mean ± SEM (n = 5). *P < 0.05 versus Norm group.P62 是自噬降解的底物，作为接头蛋白，将需要降解的胞内成分转移至自噬体内。通常地，在自噬清除多泛素化蛋白时 P62 会被优先降解。自噬过程中 LC3 和 P62 的表
陆军军医大学博士学位论文 达也收到转录水平的调节。我们发现，低氧处理后角质形成细胞中 P62 的表达显著增加其增高可能是自噬降解的下降，或者 P62 从头合成的增加所致。为了检测这种增加是否受到转录的调节，我们使用转录抑制剂，放线菌素 D（ACTD），预处理角质形成细胞结果表明（图 3-2），无论是常氧还是低氧条件下，转录抑制剂 ACTD 均可显著抑制 P6的表达，提示低氧条件下 P62 的表达受转录水平的调节。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagic activity in neuronal cell death[J]. Robert W.Button,Shouqing Luo,David C.Rubinsztein. Neuroscience Bulletin. 2015(04)
本文编号：3345797
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
创面愈合过程中创缘表皮层BNIP3及自噬水平的变化（免疫荧光）
36图 3-1 低氧条件下角质形成细胞自噬水平的变化（Western Blot 法）(A) HaCaT cells were exposed to hypoxia (2%) and incubated for the indicated times, and total proteinswere harvested for detection of autophagy markers (LC3, P62, Atg5, Atg7, Atg16L1, Beclin-1, andp-ULK1) via Western blotting. GAPDH was used as the loading control. (B-H) WB results werequantitatively analyzed. Data were shown as mean ± SEM (n = 5). *P < 0.05 versus Norm group.P62 是自噬降解的底物，作为接头蛋白，将需要降解的胞内成分转移至自噬体内。通常地，在自噬清除多泛素化蛋白时 P62 会被优先降解。自噬过程中 LC3 和 P62 的表
陆军军医大学博士学位论文 达也收到转录水平的调节。我们发现，低氧处理后角质形成细胞中 P62 的表达显著增加其增高可能是自噬降解的下降，或者 P62 从头合成的增加所致。为了检测这种增加是否受到转录的调节，我们使用转录抑制剂，放线菌素 D（ACTD），预处理角质形成细胞结果表明（图 3-2），无论是常氧还是低氧条件下，转录抑制剂 ACTD 均可显著抑制 P6的表达，提示低氧条件下 P62 的表达受转录水平的调节。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagic activity in neuronal cell death[J]. Robert W.Button,Shouqing Luo,David C.Rubinsztein. Neuroscience Bulletin. 2015(04)
本文编号：3345797
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