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NOX/NADPH氧化酶介导的ROS在激素诱导成骨细胞凋亡过程中作用机制的研究

发布时间:2021-09-01 22:51
  目的:成骨细胞作为骨组织形成与修复的重要细胞与激素性股骨头坏死关系密切,研究发现糖皮质激素的过量应用可引起骨组织受到氧化性损伤,造成成骨细胞凋亡,而氧自由基(reactive oxygen species,ROS)作为介导氧化应激性损伤的重要分子,其在激素诱导成骨细胞凋亡过程的来源及作用机制尚未明确,本实验通过体外建立高浓度地塞米松(dexamethasone,DEX)环境,探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced,NADPH)氧化酶(NADPH oxidase,NOX)介导的ROS生成对成骨细胞凋亡的影响机制。方法:取第3代小鼠MC3T3-E1成骨细胞,设空白对照组;地塞米松组(DEX组);地塞米松+ROS清除剂(N-乙酰半胱氨酸,NAC)组(DEX+NAC组);NAC组;地塞米松+NOX抑制剂(二亚苯基碘,DPI)组(DEX+DPI组);DPI组。按实验分组干预培养24 h,1.倒置显微镜下观察成骨细胞形态。2.MTT法检测成骨细胞活性。3.免疫荧光染色检测成骨细胞内ROS的生成。4.An... 

【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

NOX/NADPH氧化酶介导的ROS在激素诱导成骨细胞凋亡过程中作用机制的研究


细胞形态学观察(倒置相差显微镜×100)

组结,细胞活性,细胞突起,骨细胞


附图形态学观察(倒置相差显微镜 ×100)。a、空白对照组;b、NAC 组;d、NAC 组;e、DEX+DPI 组 f、DPI 组。b 组成骨形,细胞突起及细胞数目减少,a、c、d、e 及 f 组成骨细胞呈

免疫荧光染色,组结,细胞内,生成率


图 3 免疫荧光染色检测细胞内 ROS 生成,A:免疫荧光显微镜 ×100 B:ROS相对生成率。相对于空白对照组,DEX 组细胞 ROS 产生明显增加,DEX+DPI和 DEX+NAC 组结果与 DEX 组结果对比细胞内 ROS 产生明显减少。(x ±s, n=3,**: P<0.01, ***: P<0.001, #: P<0.01vs.DEX 组)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]细胞凋亡在激素性股骨头坏死中作用机制的研究进展[J]. 张华峰,徐倩.  中华老年骨科与康复电子杂志. 2016(02)



本文编号:3377794

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