间隙连接蛋白43表达下调对血管内皮细胞和炎症反应的作用

发布时间：2021-09-02 20:36

　　近年来研究发现,间隙连接蛋白43（connexin43,Cx43）的表达与皮肤伤口愈合关系密切。皮肤创伤后,伤口内部及其周围组织中Cx43的表达瞬时下调,可以加快皮肤伤口愈合的速率,提高伤口愈合的质量。参与皮肤伤口修复的细胞主要有三种:成纤维细胞、角质形成细胞和血管内皮细胞。有关Cx43与伤口愈合分子机制的研究表明:Cx43表达下调可以加快成纤维细胞、角质形成细胞的迁移速率,提高成纤维细胞和角化形成细胞增殖能力及角化细胞的分化能力。但Cx43是否影响血管内皮细胞的功能尚不清楚。已知血管内皮细胞会参与皮肤伤口愈合的整个过程。在炎症阶段,白细胞需要渗漏穿过毛细血管内皮层,到达创伤部位引发炎症反应。而在增殖阶段,血管内皮细胞是伤口处血管新生的主要细胞,新生血管可以为伤口区域细胞的迁移、增殖提供氧气和营养物质。基于血管内皮细胞对伤口愈合的重要性,本文研究分析Cx43下调对于血管内皮细胞功能的影响。人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）是最常用的血管内皮细胞模型,而且它对包括炎症因子在内的多种体内因子均具有良好的反应性。因此,本文选择HUVECs作为体外研究模型。小干扰RNA（si RNA）能够特... 

【文章来源】：华侨大学福建省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

间隙连接蛋白43及通道结构模式图

第一章 引言因此，将炎症反应的强度控制在合理的范围内有利于促进伤口的愈合，往往皮肤损伤后，引起过度的炎症反应，适当的降低炎症反应的强度能很好改善伤口愈合的速率和质量。炎症反应最重要的目的是将白细胞送到损伤部位，白细胞从血液中游出，到达损伤部位是炎症反应最重要的特质，白细胞经历白细胞边集、粘附、游出等阶段到达损伤部位[61]。正常情况下，白细胞随血液在血管中流动，并不断地与血管壁发生碰撞。损伤发生时，血液流动的速度减慢，白细胞与血管内皮细胞间的更易发生碰撞，并且由于血流切应力减下，白细胞就会在血管壁上形成滚动。接着，由于内皮细胞中选择素粘附分子与白细胞中配体的相互作用，使得白细胞与血管内皮细胞之间的接触也变得越来越紧密，最后，稳定粘附与血管内皮细胞表面，进一步穿过血管内皮细胞进入血管外组织[38]。

图 2.1 HUVEC 体外创伤模型示意图2 细胞免疫荧光染色事先将无菌的细胞爬片置于 24 孔细胞培养板中，将对数生长期的 HU于爬片上，补足培养基后置于 37℃、5% 二氧化碳培养箱中继续培养待细胞汇合度达到 100%时，用 10 μL 的枪头制造创伤，然后去除原培S 浸洗 2 次，之后更换 10% FBS 的新鲜培养基。将其置于 37℃、5%的 CO2培养箱中继续培养 0.5 h、1 h、3 h、6 h、48 h 后，去除原有培养基，用 PBS 浸洗 3 次，每次 3 min。每孔加入 4%的多聚甲醛 200 μL，固定爬片 20 min， 然后去除多聚S 浸洗玻片 3 次，每次 5 min。样品用 0.25% Triton X-100（PBS 配制配置）通透 10 min，之后用 P次，每次 5 min。2%的 BSA（用 PBST 稀释）室温封闭 1 h。吸水纸吸掉封闭液，除阴性对照加 25 μL 的 2%的 BSA 外，其余每张

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3379691