锌酞菁纳米颗粒光动力治疗诱导骨肉瘤细胞G2/M周期阻滞及杀伤

发布时间：2021-09-09 12:56

　　锌酞菁（ZnPc）作为第二代人工合成的光敏剂已经广泛应用到光动力治疗之中。但由于锌酞菁极易在水中析出沉淀而导致药物输送效率降低,进而降低了其诱导肿瘤光动力治疗的效果。因此,我们利用新型嵌段聚合物聚乙二醇-聚烟酸酯（PEG-PMAN）载体搭载锌酞菁,合成锌酞菁纳米颗粒,并利用MTS检测,膜联蛋白V（AnnexinV）-藻红蛋白（PE）/7-氨基放线菌素D（7-aad）标记的流式细胞仪凋亡检测等技术检测纳米化的锌酞菁诱导光动力治疗杀伤骨肉瘤效果。通过流式及蛋白免疫印迹等技术检测检测纳米酞菁颗粒光动力治疗介导的细胞周期改变,验证其诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制。同时通过动物实验进一步验证纳米锌酞菁颗粒光动力治疗体内肿瘤效果。我们结果表明,相比锌酞菁单体,纳米化的锌酞菁能够极大地加强对骨肉瘤的光动力杀伤效果,并通过促进了细胞G2/M期阻滞介导骨肉瘤细胞的凋亡。体内实验表明,纳米酞菁颗粒无明显的毒副作用,并显著抑制了肿瘤的生长。该发现表明了新型嵌段聚合物聚乙二醇-聚烟酸酯搭载的酞菁纳米颗粒具临床应用的广阔前景。 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．?ＰＰＺ纳米颗粒的结构示意图、水溶液中的稳定性和红光光区的吸收光谱

以往的文献表明，ＺｎＰｃ的吸收峰在６６０ｎｍ左右，其焚光强度与ＺｎＰｃ的含量??有关［１６］。我们应用细胞流式检测的方法来明确ＰＰＺ与ＺｎＰｃ单体在细胞内部吸收情??况（图２Ａ和Ｂ）。可见细胞内部ＰＰＺ摄取量随着ＰＰＺ浓度及作用时间的上升而增??加，然而在ＺｎＰｃ单体作用组我们未见到显著的细胞摄取，这体现了骨肉瘤细胞对??ＰＰＺ纳米颗粒的高摄取性及细胞对ＰＰＺ纳米颗粒的剂量相关性及时间相关性摄取。??我们进而通过荧光显微镜观察细胞摄取药物情况，结果与细胞流式检测的相符。??两者结果共同提示了?ＰＰＺ纳米颗粒增强骨肉瘤细胞对ＺｎＰｃ的摄取。??Ａ?ＺｎＰｃ?ＰＰＺ??＾?＂?□?Ｃｏｎｔｒｏｌ?〇＿?□?Ｃｏｎｔｒｏｌ??〇?＿?ｊ?Ｃ?〇．２５ｕＭ?Ｉ?□?０．２５ｕＭ??Ｎ?！?０．５｜ｊＭ?ｊ?０．５ｍＭ??ｃ?？：?１?１ＭＭ?幺：，?二?１ｐＭ??〇?〇?，?２ｐＭ?Ｓ＇?２ｍＭ?Ｃ?＾ＰＢＳ?ＰＥ＾ＭＡＮ＾ＺｎＰｃ?ＰＰＺ??ｉ?由幽＿｜幽＿｜??－１０３?０?１０３?１０４?１０５?－１０３?０?１０３?１０４?１０５?｜?－?－?—??Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ?至■?｜＼?｜｜?一

在ＲＬ照射后下无论是ＺｎＰｃ单体或者是ＰＰＺ均产生了明显的细胞杀伤效果??（Ｐ０．００１）。更引人关注的是，相比于ＺｎＰｃ单体或者是顺铂，ＰＰＺ介导的光动力??治疗有着更为强大的细胞杀伤能力（Ｐ＜〇．〇〇ｌ）（图３Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ）。其对ＭＮＮＧ／ＨＯＳ、??Ｕ２０Ｓ、ＳＡ０Ｓ－２?及?ＭＧ－６３?半数致死量（ＩＣ５０）分别为?０．３６，?１．４６，?０．６４?和?０．９７ｐＭ。??而先前的实验证明ＰＰＺ纳米颗粒载体ＰＥＧ－ＰＭＡＮ对四种细胞系均无毒性，排除了??载体对实验结果的影响［１３］。而ＰＰＺ光动力杀伤效果较ＺｎＰｃ单体提高的原因是ＺｎＰｃ??单体在溶液中大量结晶，影响了细胞对其的吸收摄取，这可以从ＺｎＰｃ单体组的显??微镜图片中证明（图３Ｅ）。??１１??


本文编号：3392134