透明质酸水凝胶缓释雪旺细胞外泌体修复坐骨神经长节段缺损的实验研究

发布时间：2021-09-11 19:29

　　目的:（1）体外分离新生SD大鼠雪旺细胞并培养,超速离心法提取雪旺细胞分泌的外泌体并进行特异性蛋白鉴定。透射电镜观察雪旺细胞外泌体的粒径和分布。（2）研究雪旺细胞外泌体对神经元及雪旺细胞的生物学作用。观察和研究透明质酸凝胶缓释外泌体的生物学特征参数。（3）探讨透明质酸水凝胶包裹缓释雪旺细胞外泌体填充PCL神经导管修复大鼠坐骨神经长节段缺损的形态学和功能学效果。方法:（1）采用0.1%Ⅳ型胶原酶消化法提取原代大鼠雪旺细胞,并采用DMEM/F12完全培养基培养和纯化。采用S100和Sox10进行纯度鉴定。采用CCK-8试剂盒对雪旺细胞的增殖状态进行检测。采用超高速离心法提取雪旺细胞分泌的外泌体,利用BCA试剂盒检测外泌体中蛋白的含量。Western blot法对雪旺细胞分泌外泌体表面标志物CD63、TSG101、CD9、Rab5和Na⁺/K⁺ATP酶进行鉴定。（2）构建1%浓度的透明质酸水凝胶,并将雪旺细胞外泌体进行包裹。体外放置于PBS中采用BCA试剂盒检测外泌体的缓释曲线。应用雪旺细胞外泌体干预雪旺细胞和神经元,CCK-8试剂盒检测外泌体对雪... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

雪旺细胞形态（S-100标记）

雪旺细胞体外贴壁特性

图 1.3 雪旺细胞体外增殖活性.4 雪旺细胞 S-100 和 Sox-10 标记鉴定 （绿色标记：S-100，红色标Sox-10，蓝色标记：DAPI）

【参考文献】：
期刊论文
[1]Decellularized sciatic nerve matrix as a biodegradable conduit for peripheral nerve regeneration[J]. Jongbae Choi,Jun Ho Kim,Ji Wook Jang,Hyun Jung Kim,Sung Hoon Choi,Sung Won Kwon.  Neural Regeneration Research. 2018(10)
[2]Autologous transplantation with fewer fibers repairs large peripheral nerve defects[J]. Jiu-xu Deng,Dian-yin Zhang,Ming Li,Jian Weng,Yu-hui Kou,Pei-xun Zhang,Na Han,Bo Chen,Xiao-feng Yin,Bao-guo Jiang.  Neural Regeneration Research. 2017(12)
[3]DC/CIKs细胞通过无miRNA的exosome蛋白刺激后能增强对胰腺癌细胞的免疫作用（英文）[J]. Ri-sheng QUE,Cheng LIN,Guo-ping DING,Zheng-rong WU,Li-ping CAO.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(05)



本文编号：3393584