缺氧/复氧对滑膜细胞IGF系统及炎性介质生物学效应的影响

发布时间：2021-09-19 10:00

　　目的:缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）在骨关节炎（osteoarthritis,OA）的病理发生机制中起着重要作用。成纤维样滑膜细胞对H/R刺激高度敏感,被认为参与OA进展过程中的软骨降解。本研究主要检测H/R对滑膜细胞胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor,IGF）系统以及炎性介质的效应。方法:分离培养正常原代滑膜细胞并进行免疫荧光鉴定;H/R模型的建立:轮流将细胞培养皿置于缺氧条件（1%O₂）2 h,常规培养条件2 h,重复进行3个循环。收集细胞培养上清液,血气分析仪监测培养条件氧分压。酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞培养上清液趋化因子CCL-5、IL-1β和IL-6的水平;实时定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测滑膜细胞中IGF-1、IGFBP-3的mRNA表达水平;Western Blot检测滑膜细胞中IGF-1、IGFBP-3、COX-2、ADAMTS-5、MMP-13、INOS、P-P65、P65、P-IκB和IκB的蛋白表达水平;流式细胞仪检测滑膜细胞内活性氧（reactive ... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代成纤维样滑膜细胞从滑膜组织分离培养的成纤维样滑膜细胞

传代成纤维样滑膜细胞（A）为第一代滑膜细胞；（B）为第二代滑膜细胞；（C）为第三代滑膜细胞

成纤维样滑膜细胞免疫荧光鉴定（A）为成纤维样滑膜细胞Vimentin阳性；（B）为成纤维样滑膜细胞CD90/Thy-1阳性，细胞核为蓝色(100

【参考文献】：
期刊论文
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[2]新生大鼠成骨细胞原代培养与鉴定[J]. 程浩,张延芳,许巍.  中国组织工程研究. 2013(41)
[3]大鼠膝骨关节炎滑膜细胞原代培养[J]. 袁琴,阚卫兵,宋朋飞,张隆,王拥军.  现代生物医学进展. 2012(02)
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本文编号：3401401