转录因子FOXO4在大鼠软骨细胞退变中的相关性研究

发布时间：2021-10-13 07:16

　　目的:检测转录因子FOXO4在大鼠软骨细胞中的表达,通过建立有效的软骨细胞退变模型,探讨FOXO4在大鼠软骨细胞退变中的相关性。方法:（1）分别取4周与16周SD大鼠的股骨头软骨,采用Ⅱ型胶原酶分步消化法进行细胞分离培养,以获取正常及自然退变的原代软骨细胞;（2）原代软骨细胞在传至第1代后,使用甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色及Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学染色等方法进行细胞鉴定;（3）将实验分为3组。对照组:取自4周龄大鼠的第2代软骨细胞;自然退变组:取自16周龄大鼠的第2代软骨细胞;诱导退变组:以终浓度10ng/mL1L-1β对4周龄大鼠软骨细胞从第1代开始进行诱导退变处理,并在传至第2代时继续诱导后进行后续实验;（4）显微镜下观察细胞形态改变,并采用β-半乳糖苷酶染色法进行衰老检测;（5）用RT-PCR分别检测各组软骨细胞中FOXO4和col2α的mRNA表达水平,Western Blot分别检测各组软骨细胞中FOXO4和Ⅱ型胶原蛋白表达水平。结果:（1）4周龄大鼠股骨头软骨与软骨下骨结合较为松弛,易于完整取下,呈半透明状,中部厚实,质地韧而脆,易于切割;16周龄大鼠股骨头软骨与软骨下骨结合... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SD大鼠股骨头软骨（A、B）4周龄大鼠；（C）16周龄大鼠

图 2 原代大鼠软骨细胞（A、B、C）：取自 4 周龄大鼠的软骨细胞在 48h、4d、7d 时的显微镜下表现；（D、E）：取自 16 周龄大鼠的软骨细胞在 7d 时的显微镜下表现

第1代软骨细胞的形态学表现（A）显微镜；（B）甲苯胺蓝染色；（C）阿利新蓝染色；（D）Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3434202