TRPV1功能阻断对大鼠坐骨神经离断损伤后再生修复的干预
发布时间：2021-10-30 10:20
目的:1.明确大鼠坐骨神经离断性损伤后瞬时受体电位阳离子通道亚家族成员V1（TRPV1）表达水平及功能状态的变化;2.探讨损伤后TRPV1功能阻断对大鼠坐骨神经离断损伤后神经再生的干预作用;3.研究损伤后TRPV1功能阻断对大鼠坐骨神经离断损伤后损伤局部再生相关蛋白表达水平的影响;4.为周围神经损伤的修复提供新的治疗靶点。方法:1.实验分为7组:正常对照组,单纯损伤组,损伤+AMG-517 150μg/kg组及损伤+AMG-517 300μg/kg组,除对照组外,其余各组再根据损伤后取材时间不同分为术后1周和2周组。神经损伤采用大鼠左后肢坐骨神经离断术;药物干预采用坐骨神经离断术后30min左右用微量注射器于损伤同侧L3、L4及L5背根神经节（DRG）周围注射不同剂量TRPV1阻断剂AMG-517（150μg/kg,300μg/kg）。2.于术后1周和2周取材,分别采用ELISA、环氧树脂-半薄切片（1μm）-甲苯胺蓝染色、聚丙烯酰胺凝胶电泳—western blot及间接免疫荧光等方法对脊髓后角的CGRP释放、坐骨神经...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ELISA法检测AMG-517对脊髓背角CGRP释放量的影响
山西医科大学硕士学位论文2.2 DRG 周围注射 AMG-517 可降低 TRPV1 在 DRG 的表达通过 SDS-PAGE 及 western blot 检测显示：单纯坐骨神经损伤后 TRPV1 的表达显著增加，尤以损伤后2周时表达最为显著，几乎是对照组的两倍（图2B，P <0.001）。当采用 AMG-517 局部注射干预后（包括 1 周和 2 周组）DRG 内 TRPV1 的表达水平明显下调，接近对照组（图 2，P < 0.001）。 结果提示 AM-517 不仅阻断 TRPV1的功能、干预细胞内信号传导，同时，也可降低 DRG 的 TRPV1 的表达，使其功能进一步被抑制。因此，于神经损伤后局部给予 AMG-517 是一种行之有效的 TRPV1阻断措施和手段。
图 3 各组坐骨神经横断面及轴突计数A：各组坐骨神经横断面半薄切片-甲苯胺蓝染色。B：各组坐骨神经横断面有髓轴突计数及其统计学分析。#P<0.05,###P<0.001 与对照组相比；***P< 0.001, 与单纯损伤组相比。 所示为轴突, Scale bar =10 μm。2.2 TRPV1 的功能阻断可改善损伤后神经内的细胞反应间质细胞反应是坐骨神经损伤后的另一个特征性表现。坐骨神经损伤后 1 周时，损伤局部间质内细胞反应非常显著，尤其是采用 AMG-517 阻断 TRPV1 功能后，细胞反应更为明显， 例如：单纯损伤组的间质内细胞数目（Nkaryocyte）为 61 3，而AMG-517 用药组的 Nkaryocyte为 85±3（150 μg/kg）和 112±5（AMG-517 300μg/kg）。形态学的特征提示：损伤后 1 周时各组神经间质内的有核细胞多数为巨噬细胞（显著的吞噬现象）；而于损伤后 2 周时，AMG-517 用药组的细胞反应明显减轻，有
【参考文献】：
期刊论文
[1]Blockade of transient receptor potential cation channel subfamily V member 1 promotes regeneration after sciatic nerve injury[J]. Fei Ren,Hong Zhang,Chao Qi,Mei-ling Gao,Hong Wang,Xia-qing Li. Neural Regeneration Research. 2015(08)
本文编号：3466557
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ELISA法检测AMG-517对脊髓背角CGRP释放量的影响
山西医科大学硕士学位论文2.2 DRG 周围注射 AMG-517 可降低 TRPV1 在 DRG 的表达通过 SDS-PAGE 及 western blot 检测显示：单纯坐骨神经损伤后 TRPV1 的表达显著增加，尤以损伤后2周时表达最为显著，几乎是对照组的两倍（图2B，P <0.001）。当采用 AMG-517 局部注射干预后（包括 1 周和 2 周组）DRG 内 TRPV1 的表达水平明显下调，接近对照组（图 2，P < 0.001）。 结果提示 AM-517 不仅阻断 TRPV1的功能、干预细胞内信号传导，同时，也可降低 DRG 的 TRPV1 的表达，使其功能进一步被抑制。因此，于神经损伤后局部给予 AMG-517 是一种行之有效的 TRPV1阻断措施和手段。
图 3 各组坐骨神经横断面及轴突计数A：各组坐骨神经横断面半薄切片-甲苯胺蓝染色。B：各组坐骨神经横断面有髓轴突计数及其统计学分析。#P<0.05,###P<0.001 与对照组相比；***P< 0.001, 与单纯损伤组相比。 所示为轴突, Scale bar =10 μm。2.2 TRPV1 的功能阻断可改善损伤后神经内的细胞反应间质细胞反应是坐骨神经损伤后的另一个特征性表现。坐骨神经损伤后 1 周时，损伤局部间质内细胞反应非常显著，尤其是采用 AMG-517 阻断 TRPV1 功能后，细胞反应更为明显， 例如：单纯损伤组的间质内细胞数目（Nkaryocyte）为 61 3，而AMG-517 用药组的 Nkaryocyte为 85±3（150 μg/kg）和 112±5（AMG-517 300μg/kg）。形态学的特征提示：损伤后 1 周时各组神经间质内的有核细胞多数为巨噬细胞（显著的吞噬现象）；而于损伤后 2 周时，AMG-517 用药组的细胞反应明显减轻，有
【参考文献】：
期刊论文
[1]Blockade of transient receptor potential cation channel subfamily V member 1 promotes regeneration after sciatic nerve injury[J]. Fei Ren,Hong Zhang,Chao Qi,Mei-ling Gao,Hong Wang,Xia-qing Li. Neural Regeneration Research. 2015(08)
本文编号：3466557
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