BMSC/纤维膜复合细胞层进行骨软骨再生修复研究

发布时间：2021-11-08 07:19

　　骨关节炎、软骨磨损和骨软骨组织缺损是临床中常见的问题,骨软骨组织工程是一种治疗骨软骨缺损最具潜力的手段,制备能保持种子细胞的增殖、分化活性,且与体内微环境匹配的仿生支架对骨软骨组织工程至关重要。骨软骨结构复杂,构建仿生梯度支架有难度,而且现有种子细胞复合支架的组织工程策略,获取种子细胞时可能造成对细胞黏附分子和细胞间连接信号的破坏,接种时可能会发生种子细胞的流失。采用细胞层技术可避免上述问题,获得的具有完整细胞外基质细胞层,可极大程度地保存细胞活性,通过多层叠加构建三维组织修复体,用于骨软骨组织再生研究具有优势。为赋予细胞层良好的操作性和调控性,本研究以静电纺丝法制备的纤维膜为支撑,孵育骨髓间充质干细胞（BMSCs）细胞层,BMSCs是具有多向分化潜能的成体干细胞,纤维膜仿生天然细胞外基质的结构,为BMSCs的增殖和分化创造有利微环境。针对骨软骨再生修复,本论文重点探索了 BMSCs细胞层在体外的成软骨、成钙化软骨和成骨分化调控,并仿生构建了三维梯度骨软骨修复体植入新西兰白兔膝关节骨软骨缺损,评价了梯度诱导分化的BMSCs细胞层/纤维膜复合体用于骨软骨再生修复的可行性。首先,制备了无纺... 

【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１静电纺丝装置示意图??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｉｎｎｉｎｇ?ａｐｐａｒａｔｕｓ??

?ｆ??Ｒ?咖?ｉａｇ?ｇｒｗｍｄｅｄ?？Ｕｅｃｉ４？：?ｄ？ａ？??图１－１静电纺丝装置示意图??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｉｎｎｉｎｇ?ａｐｐａｒａｔｕｓ??１．１．５常用的骨软骨种子细胞??骨软骨组织工程修复重建的效果与种子细胞有着密不可分的联系。种子细胞的选??择需要考虑以下几点［１９］：?（１）对供体损伤较小，并且取材操作步骤方便简单；（２）??增殖性能良好且可控、具有分化潜能；（３）没有致瘤性风险；（４）不引起明显炎症??反应，免疫原性低。骨软骨组织工程的种子细胞，依据细胞的分化能力，分为成熟体??细胞与具备多向分化潜能的干细胞两种［４９】。??骨软骨组织，由于具备不同的结构与丰富的细胞种类所以成熟的成体细胞，??主要选用成骨细胞与软骨细胞作为种子细胞。成骨细胞移植后，仍能保持分化状态和??一定的增殖能力；软骨细胞移植后仍具备软骨分化状态，但增殖能力较差，通常其提??取过程还会对宿主机体造成影响［５Ｇ］。由于这两种细胞摆脱不了普通成熟成体细胞的自??身局限性，不适合大规模使用。??ＢＭＳＣｓ是一种常用的多能干细胞，在不同的诱导条件下，可向脂肪、骨、软骨、??肌腱等不同方向进行分化［５１］

２．３．１?ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ纤维膜的表征??在静电场的牵伸作用下，以４００ｒｐｍ转速滚筒接收器接收到的ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ复合??纤维膜，经ＥＤＣ／ＮＨＳ交联后，如图２．１所示，纤维呈多向不规则排布，纤维表面光??滑，无明显的串珠、融并出现。由丨ｍａｇｅ?Ｊ分析，纤维平均直径为７４９?ｎｍ?（图２－??２Ａ）。纤维膜具有较高的孔隙率及连续孔结构，纤维间距为１０?左右（图２－??２Ｂ）。纤维堆积可以为细胞生长提供支撑作用，而高的孔隙率可以为细胞间的物质??交换及代谢产物排出提供条件，利于在纤维膜表面高密度细胞培养形成细胞层。??ｍｕ??图２－１?ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ复合纤维膜ＳＥＭ照片??Ｆｉｇ．?２－１?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ?ｆｉｂｒｏｕｓ?ｍｅｓｈｅｓ??１８??

【参考文献】：
期刊论文
[1]rhBMP-2、胶原、珊瑚复合骨诱导骨形成生物活性的实验研究[J]. 马秦,毛天球,刘宝林,戴毅敏,韩亮.  华西口腔医学杂志. 2000(02)

硕士论文
[1]PLLA/明胶纳米纤维膜在不同模拟体液中生物矿化过程研究[D]. 郭有刚.北京化工大学 2015



本文编号：3483264