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ZIC1基因过表达可通过下调Survivin基因抑制乳腺癌的生长

发布时间:2021-11-18 14:17
  背景与目的ZIC1基因和Survivin基因分别被认为是一个潜在的抑癌基因和促癌基因,并在乳腺恶性肿瘤的发生、发展中起到了重要的作用。本研究旨在进一步确认ZIC1基因在乳腺癌中的作用,分析ZIC1基因与Survivin基因在乳腺癌中的表达水平相关性,并探索与ZIC1基因相关的分子机制。方法(1)收集120例在2014年-2015年间于上海长海医院行乳腺癌根治术的浸润性乳腺癌患者,应用免疫组织化学技术检测乳腺癌组织及对应的癌旁组织中ZIC1蛋白和Survivin蛋白的表达水平,并分析癌组织中两种表达的相关性;(2)选取六种人乳腺癌细胞株(MCF-7,MDA-MB-231,MDA-MB-453,SK-BR3,BT-474和BT-549),和一种人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A,常规培养后,提取总蛋白,进行western blotting技术检测ZIC1蛋白与Survivin蛋白的表达情况,并筛选合适的乳腺癌细胞株用于后续实验;(3)应用r LV-Zs Green-PGK-Puro和r LV-Zic1-PGK-Puro慢病毒颗粒进行细胞转染,嘌呤霉素筛选细胞后,稳定培养,并应用荧光显微镜及... 

【文章来源】:江苏大学江苏省

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

ZIC1基因过表达可通过下调Survivin基因抑制乳腺癌的生长


0例浸润性乳腺癌组织及癌旁组织中ZIC1及Surivivn表达情况(×400)

蛋白表达,细胞内,乳腺癌细胞株,情况


ZIC1 基因过表达可通过下调 Survivin 基(MCF-10A)和六种人乳腺癌细胞株(MCSK-BR3, BT-474 and BT-549)内 ZIC1 蛋白与中可见,六种乳腺癌细胞株内 ZIC1 蛋白表达皮细胞内的表达;然而,六种乳腺癌细胞株MCF-10A 乳腺正常上皮细胞内的表达。另外,和 SK-BR3 这两株乳腺癌细胞株内,其平均 Z腺癌细胞较低,为了在之后的细胞转染以及体果,我们选择该两株细胞株为研究对象,进行乳腺癌细胞生物学行为的检测。

慢病毒,转染,细胞内,稳定转染


江苏大学硕士学位论文blotting 技术检测比较“Vector”组与“ZIC1”组两种细胞内 ZIC1 蛋白的差异(图 3B 和图 3C):稳定转染 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒MDA-MB-231 和 SK-BR3 细胞内,ZIC1 蛋白水平明显升高,说明慢病果较好,转染成功。不仅如此,我们还发现,稳定转染 rLV-Zic1-PGK毒颗粒后的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 细胞内,Survivin 蛋白表达水平这意味着,乳腺癌细胞中 ZIC1 蛋白过表达后,Survivin 蛋白受到明显用。

【参考文献】:
期刊论文
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[2]小脑锌指结构1基因转染对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、周期、凋亡的影响[J]. 汪华兵,史春桃,于民,韩玮,曹方,丁厚中.  山东医药. 2016(23)
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[4]ZIC1联合苦参碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移及凋亡的影响[J]. 于民,曹方,朱荣,丁厚中.  现代肿瘤医学. 2016(10)
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[10]ZIC1、cyclinD1和p16在脂肪肉瘤中的表达及临床意义[J]. 林玲,范钦和,张玉梅.  诊断病理学杂志. 2012(03)



本文编号:3503055

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