RIPK1激酶活性在围术期卒中致病机理中的作用研究
发布时间：2021-12-11 14:05
研究背景:围术期卒中（Perioperative Stoke）是一种致残率高,致死率高的围术期并发症,且目前尚无特异性治疗药物。受体相互作用蛋白激酶1（Receptor interacting protein kinase 1,RIPK1）作为细胞内重要的骨架蛋白与信号转导分子,参与程序性细胞坏死,细胞凋亡及炎症等多条通路的调控,但其在围术期卒中中的作用尚未完全明确。研究目的及意义:明确RIPK1激酶活性在围术期卒中致病机理中的作用,并对其可能的机制进行探讨,从而为围术期卒中的治疗提供一定的实验依据,为神经保护药物的研发提供新的思路。研究方法:8-10周龄雄性C57BL/6背景野生型（WT）小鼠,随机分为sham组与MCAO组。通过线栓法建立急性脑缺血再灌注损伤模型,MCAO组缺血1h后拔出线栓,sham组当线栓插入遇到阻力后即刻拔出。于再灌注24h后收集脑组织,通过qRT-PCR法检测RIPK1分子mRNA水平的表达;通过免疫印迹法检测RIPK1蛋白水平的表达。另取8-10周龄雄性C57BL/6背景野生型（WT）与RIPK1激酶缺失(Ripk1Δ/Δ,Ripk1...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MCAO模型中线栓入路示意图
上海交通大学医学院硕士学位论文21所有数据采用均数±标准差(Mean±SD)表示,统计分析与作图由GraphPadPrism7软件完成，且采用T检验统计分析数据。（*表示P值小于0.05，**表示P值小于0.01,***表示P值小于0.001,****表示P值小于0.0001）。3结果3.1成功建局灶性脑缺再灌注损伤模型分别取造模24h后sham组与MCAO组小鼠脑组织进行切片并TTC染色，结果如图2-2-A所示，左侧纵列为sham组从前至后排列的鼠脑切片；右侧纵列为MCAO组从前至后排列的鼠脑切片。sham组小鼠脑组织结构完整，双侧对称，且均匀地被染成红色；而MCAO组小鼠病灶侧体积明显增加，大脑中动脉供血区域出现白色梗塞病灶。对梗塞体积进行统计分析，脑梗塞率=梗塞体积/半侧大脑体积×100%。统计结果如图2-2-B所示，sham组脑梗塞率为0±0,（n=10）；MCAO组脑梗塞率为0.5933±0.02843,（n=10），且两组之间P<0.0001，具有统计学意义。以上结果说明本实验采用的模型相对稳定。图2-2MCAO模型中的脑梗死体积增加A．sham组与MCAO组小鼠脑组织切片TTC染色。红色部分为正常组织，白色部分为梗塞区域。B．sham组与MCAO组小鼠脑梗塞体积比例。“****”表示P<0.0001。Figure2-2InfarctionvolumeofthebrainwasincreasedinMCAO
上海交通大学医学院硕士学位论文22A．TTCstainingofthebraintissueslicesinshamgroupandMCAOgroup.Theredpartisthenormalareaandthewhitepartistheinfarctionarea.B.PercentageoftheinfarctionvolumeintherightbrainbetweenshamgroupandMCAOgroup.“****”meansP<0.0001.3.2.脑缺再灌注损伤增加神经为学评分本实验分别采用Longa5分制评分法131,132和Clark评分法133两种神经行为学评分系统对造模后小鼠的神经功能进行评估。如图2-3-A所示，与sham组相比，MCAO组小鼠Longa评分升高（1.2±0.1333,n=10，P<0.0001）；如图2-3-B所示，与sham组相比，MCAO组小鼠Clark一般功能损伤评分显著升高（1.5±0.2236,n=10，P<0.0001）；如图2-3-C所示，与sham组相比，MCAO组的Clark局灶性功能损伤评分亦显著升高（9.9±0.5667,n=10，P<0.0001）。综上所述，与sham组相比，MCAO组小鼠两种神经行为学评分均增加。此结果说明，造模后小鼠的神经功能受到一定程度的损伤。图2-3MCAO建模后小鼠神经行为学评分变化A.sham组与MCAO组的Longa评分；B.sham组与MCAO组的Clark一般功能损伤评分；C.sham组与MCAO组的Clark局灶性功能损伤评分。“****”表示P<0.0001。Figure2-3NeurologicalscoreofmouseafterMCAOA.LonganeurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup；B.ClarkgeneralneurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup；C.ClarkfocalneurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup.“****”meansP<0.0001.
【参考文献】：
期刊论文
[1]三种神经功能评分在鼠类局灶性脑缺血模型评价中的比较[J]. 程发峰,宋文婷,郭少英,钟相根,鲁艺,王庆国. 中国康复医学杂志. 2011(04)
本文编号：3534814
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MCAO模型中线栓入路示意图
上海交通大学医学院硕士学位论文21所有数据采用均数±标准差(Mean±SD)表示,统计分析与作图由GraphPadPrism7软件完成，且采用T检验统计分析数据。（*表示P值小于0.05，**表示P值小于0.01,***表示P值小于0.001,****表示P值小于0.0001）。3结果3.1成功建局灶性脑缺再灌注损伤模型分别取造模24h后sham组与MCAO组小鼠脑组织进行切片并TTC染色，结果如图2-2-A所示，左侧纵列为sham组从前至后排列的鼠脑切片；右侧纵列为MCAO组从前至后排列的鼠脑切片。sham组小鼠脑组织结构完整，双侧对称，且均匀地被染成红色；而MCAO组小鼠病灶侧体积明显增加，大脑中动脉供血区域出现白色梗塞病灶。对梗塞体积进行统计分析，脑梗塞率=梗塞体积/半侧大脑体积×100%。统计结果如图2-2-B所示，sham组脑梗塞率为0±0,（n=10）；MCAO组脑梗塞率为0.5933±0.02843,（n=10），且两组之间P<0.0001，具有统计学意义。以上结果说明本实验采用的模型相对稳定。图2-2MCAO模型中的脑梗死体积增加A．sham组与MCAO组小鼠脑组织切片TTC染色。红色部分为正常组织，白色部分为梗塞区域。B．sham组与MCAO组小鼠脑梗塞体积比例。“****”表示P<0.0001。Figure2-2InfarctionvolumeofthebrainwasincreasedinMCAO
上海交通大学医学院硕士学位论文22A．TTCstainingofthebraintissueslicesinshamgroupandMCAOgroup.Theredpartisthenormalareaandthewhitepartistheinfarctionarea.B.PercentageoftheinfarctionvolumeintherightbrainbetweenshamgroupandMCAOgroup.“****”meansP<0.0001.3.2.脑缺再灌注损伤增加神经为学评分本实验分别采用Longa5分制评分法131,132和Clark评分法133两种神经行为学评分系统对造模后小鼠的神经功能进行评估。如图2-3-A所示，与sham组相比，MCAO组小鼠Longa评分升高（1.2±0.1333,n=10，P<0.0001）；如图2-3-B所示，与sham组相比，MCAO组小鼠Clark一般功能损伤评分显著升高（1.5±0.2236,n=10，P<0.0001）；如图2-3-C所示，与sham组相比，MCAO组的Clark局灶性功能损伤评分亦显著升高（9.9±0.5667,n=10，P<0.0001）。综上所述，与sham组相比，MCAO组小鼠两种神经行为学评分均增加。此结果说明，造模后小鼠的神经功能受到一定程度的损伤。图2-3MCAO建模后小鼠神经行为学评分变化A.sham组与MCAO组的Longa评分；B.sham组与MCAO组的Clark一般功能损伤评分；C.sham组与MCAO组的Clark局灶性功能损伤评分。“****”表示P<0.0001。Figure2-3NeurologicalscoreofmouseafterMCAOA.LonganeurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup；B.ClarkgeneralneurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup；C.ClarkfocalneurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup.“****”meansP<0.0001.
【参考文献】：
期刊论文
[1]三种神经功能评分在鼠类局灶性脑缺血模型评价中的比较[J]. 程发峰,宋文婷,郭少英,钟相根,鲁艺,王庆国. 中国康复医学杂志. 2011(04)
本文编号：3534814
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