基于大鼠和小鼠骨发育探究糖皮质激素致股骨头病变机制

发布时间：2022-01-01 20:33

　　目的:1.比较近交系和封闭群大鼠及小鼠发育过程中股骨头和胫骨骨骺的骨量变化,探究不同品系大鼠和小鼠股骨头及胫骨骨骺的骨发育差异。2.观察甲强龙对C57BL/6J小鼠股骨头及胫骨骨骺骨量及骨代谢相关因子的影响,探究糖皮质激素诱发股骨头骨组织病变的可能机制。方法:1.大鼠和小鼠骨发育模型及其标本制备选用雌性封闭群SD及近交系Wistar 3、6月龄大鼠和雌雄各半C57和BABL/c 1、1.5、2、3、4、4.5、5、6、7、8、9月龄小鼠,分别取左右侧股骨头和胫骨上段,采用骨形态计量学方法,比较不同品系大、小鼠不同生长发育阶段中股骨头和胫骨上段骨骺的骨量变化。2.甲强龙（methylprednisolone,Met）对C57小鼠股骨头、胫骨上段骨骺端骨组织的影响SPF级雌性4、6月龄C57小鼠各16只,分别随机分为对照（4M-C、6M-C）和Met组（4M-Met、6M-Met）,第1周Met组肌肉注射Met 40mg/kg/d,此后连续3周肌肉注射Met 20mg/kg/d,共给药30天,对照组肌肉注射生理盐水0.1ml/30g/d。停药次日,取小鼠左右侧股骨头和胫骨上段,采用骨形态计... 

【文章来源】：广东药科大学广东省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

股骨头切面示意图

置于载玻片上，50℃干燥箱中烘过夜。苯胺蓝染色步骤：二甲苯 I (室温，10min) →二甲苯Ⅱ(室温，10min乙 醇 I10min→100 ％ 乙 醇 Ⅱ 10min→95 ％ 乙 醇 5min → 80% 乙75％乙醇 5min→蒸馏水洗 5min→ 甲苯胺蓝染色 2min (由标本预染色染色时间) →自来水冲洗→95％乙醇 I3s→ 100％乙醇 I3min → 100％乙 → 二甲苯 I5min→ 二甲苯Ⅱ5min→ 中性树胶封片。骨形态计量学分析组织 (二维) 形态计量学是基于骨质疏松的细胞和组织学形态改变导变而进行的一门体视学定量研究技术。将股骨头、胫骨上段切 5um ED片，甲苯胺蓝染色，在显微镜下观察，用图像分析软件对划定范围进行骨头切片定位：以股骨头凹为顶点，连接冠状剖面两侧的软骨前后缘为定平面。骨切片定位：修片至骨组织面积最大且生长板左右对称。

广东药科大学硕士研究生学位论文头指股骨头凹，红色剪头指股骨头前后缘。范围及测量参数：(1) 骺板未闭合股骨头、胫骨上段：因其骺板未下骨板至骺板范围，测量该范围总面积及骨组织面积。骺板闭合股骨头：骺板已消失，连接股骨头冠状剖面两侧的软骨前向至软骨下骨板范围。测量该区域内总面积及骨组织面积。

【参考文献】：
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本文编号：3562794