MALAT1通过miR-199b/IKKβ/NF-κB信号通路调节小胶质细胞的炎症反应

发布时间：2022-01-08 17:07

　　背景:急性脊髓损伤（ASCI）继发的小胶质细胞（MGs）的炎症反应是加重脊髓损伤的重要因素。长链非编码RNA（Lnc RNA）转移相关肺腺癌转录本1（MALAT1）被广泛认为与人类癌症、血管疾病和神经系统疾病相关。近期研究表明,与MALAT1相关的miR-199b参与脊髓损伤后的炎症反应。本研究旨在探讨MALAT1在急性脊髓损伤（ASCI）后小胶质细胞炎症反应中的作用及相关机制研究。方法:通过Allen’s改良法建立成年大鼠的ASCI模型,通过BBB评分检测大鼠行为学。LPS诱导小胶质细胞建立炎性反应模型,构建慢病毒质粒并转染敲除MALATA1 及 miR-199b。使用 Real-time PCR 测定大鼠和体外 ASCI 后 MALAT1和miR-199b的表达谱。运用RNA pull-down及RIP方法来探讨MALAT1与miR-199b之间的相互作用。通过Western blot检测下游相关信号通路蛋白Iba-1,IKKβ,p-IκBα和p-p65表达。通过ELISA检测炎性因子TNF-α和IL-1β的表达。结果:研究结果提示,大鼠挫伤脊髓中MALAT1表达显著增加（对照的2... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【图文】：

大鼠急性脊髓损伤后MAL八Tl和n五R一199b的表达谱

我们假设ＭＡＬＡＴ１参与了?ＬＰＳ诱导的小胶质细胞活化和促炎细胞因子的产??生。通过转染ｓｉＲＮＡ－ＭＡＬＡＴｌ，在体外被ＬＰＳ活化的小胶质细胞ＢＶ２和Ｎ９中抑??制ＭＡＬＡＴ１?（图４．３Ａ）。我们发现ＭＡＬＡＴ１抑制降低了?ＬＰＳ诱导的Ｉｂａ－ｌ蛋白上??调，后者是活化小胶质细胞的标志物（图４．３Ａ）。此外，敲除ＭＡＬＡＴ１显著降低??２４??

浙江大学硕上学位论文?实验结果??如图４．４Ａ所示，呈现在ｍｉＲ－１９９ｂ中，表明ＭＡＬＡＴ１和ｍｉＲ－１９９ｂ之间可能的相??互作用。进行ＲＩＰ测定，我们发现ＭＡＬＡＴ１和ｍｉＲ－１９９ｂ都存在于Ａｇｏ２蛋白复合??物中（图４．４Ｂ）。ＲＮＡ?ｐｕ丨１－ｄｏｗｎ显示生物素化的ＭＡＬＡＴ１拉下的复合物中富含??Ａｇｏ２?蛋白和?ｍｉＲ－１９９ｂ?（图?４．４，Ｃ?和?Ｄ）。??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Multifunctional biomimetic spinal cord: New approach to repair spinal cord injuries[J]. Yang Liu,Qian Li,Bin Zhang,De-Xiang Ban,Shi-Qing Feng.  World Journal of Experimental Medicine. 2017(03)



本文编号：3576946