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七氟醚预处理优化心肌细胞糖酵解减轻缺氧/复氧损伤的机制研究

发布时间:2022-01-21 07:21
  目的:探讨七氟醚预处理(SPC)减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤是否与激活信号通路HIF-1a/PDK-1,优化H9C2大鼠心肌细胞无氧糖酵解有关。方法:H9C2心肌细胞用低糖培养基培养48h后,随机分成4组:(1)对照组(Con);(2)缺氧/复氧组(H/R);(3)七氟醚预处理组(SPC);(4)七氟醚预处理组+HIF-1a抑制剂组(SPC+YC-1);建立缺氧/复氧模型,在复氧3h后,检测乳酸脱氢酶(LDH)、己糖激酶(HK)、6-磷酸果糖激酶-1(PFK-1)、丙酮酸激酶(PK);检测各组ATP产生量;流式检测心肌细胞凋亡比例;荧光显微镜分析膜电位变化;Western Blot检测HIF-1a、PDK-1、GAPDH及凋亡相关蛋白含量。结果:与缺氧/复氧组(H/R)相比,SPC组中调控糖酵解的关键酶(HK、PFK-1、PK)含量增加,产生ATP量增多,线粒体膜电位升高,细胞凋亡比率减少,HIF-1a、PDK-1、Bcl-2蛋白含量增加,Bax蛋白含量降低(P<0.05);与七氟醚预处理组(SPC)相比,加入HIF-1a抑制剂(YC-1)后,糖酵解关键酶(HK、PFK-... 

【文章来源】:新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】:48 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

七氟醚预处理优化心肌细胞糖酵解减轻缺氧/复氧损伤的机制研究


细胞试验示意图

心肌,细胞,统计学


新疆医科大学硕士学位论文12结果1H9C2大鼠心肌细胞的正常形态荧光倒置显微镜下观察H9C2心肌细胞,完全贴壁,细胞形态呈现梭形。图1a正常心肌细胞(10X)图1b正常心肌细胞(20X)Fig1aNormalcardiomyocytes(10X)Fig1bNormalmyocardialcells(20X)2乳酸脱氢酶(LDH)水平及细胞活力检测复氧3h末,各组间LDH水平比较:与Con组相比,H/R组、SPC组、S+YC-1组细胞乳酸脱氢酶的水平显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比,SPC组细胞LDH水平明显降低(P<0.05),S+YC-1组细胞LDH水平差异无统计学意义(P>0.05);与SPC组相比,S+YC-1组细胞LDH水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。如图2A复氧3h末,各组间细胞活性比较:与Con组相比,H/R组、SPC组、S+YC-1组细胞活性显著降低(P<0.05);与H/R组相比,SPC组细胞活性增高,S+YC-1组细胞活性降低(P<0.05);与SPC组相比,S+YC-1组细胞活性显著降低,差异无统计学意义(P<0.05)。如图2B

心肌,细胞,统计学


新疆医科大学硕士学位论文12结果1H9C2大鼠心肌细胞的正常形态荧光倒置显微镜下观察H9C2心肌细胞,完全贴壁,细胞形态呈现梭形。图1a正常心肌细胞(10X)图1b正常心肌细胞(20X)Fig1aNormalcardiomyocytes(10X)Fig1bNormalmyocardialcells(20X)2乳酸脱氢酶(LDH)水平及细胞活力检测复氧3h末,各组间LDH水平比较:与Con组相比,H/R组、SPC组、S+YC-1组细胞乳酸脱氢酶的水平显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比,SPC组细胞LDH水平明显降低(P<0.05),S+YC-1组细胞LDH水平差异无统计学意义(P>0.05);与SPC组相比,S+YC-1组细胞LDH水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。如图2A复氧3h末,各组间细胞活性比较:与Con组相比,H/R组、SPC组、S+YC-1组细胞活性显著降低(P<0.05);与H/R组相比,SPC组细胞活性增高,S+YC-1组细胞活性降低(P<0.05);与SPC组相比,S+YC-1组细胞活性显著降低,差异无统计学意义(P<0.05)。如图2B

【参考文献】:
期刊论文
[1]七氟醚后处理对体外循环下心脏手术患者的心肌保护效应:meta分析[J]. 侯天亮,叶建荣,杨龙,郑宏.  中华麻醉学杂志. 2019 (07)
[2]《中国心血管病报告2017》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿.  中国循环杂志. 2018(01)
[3]Impact of diabetes mellitus on risk of cardiovascular disease and all-cause mortality: Evidence on health outcomes and antidiabetic treatment in United States adults[J]. Longjian Liu,Barbara Simon,Jinggaofu Shi,Arshpreet Kaur Mallhi,Howard J Eisen.  World Journal of Diabetes. 2016(18)
[4]七氟醚预处理对缺氧诱导因子1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响[J]. 孙文波,张立民,康立娜,吴春玲,黄冬冬,孙秀伟.  临床麻醉学杂志. 2015(08)
[5]缺氧诱导因子1α对缺氧条件下大鼠心肌细胞糖酵解的影响[J]. 党永明,黄跃生,周军利,张家平,颜洪,张铭.  中华烧伤杂志. 2005(05)



本文编号:3599822

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