Ski在大鼠星形胶质细胞炎症活化中的作用研究

发布时间：2022-01-26 00:12

　　目的:Ski作为一种进化保守蛋白,广泛分布于不同的组织和细胞,涉及多种细胞过程。前期研究发现,Ski在脊髓损伤后反应性星形胶质细胞的增殖和迁移过程中发挥重要的调节作用。星形胶质细胞的炎症活化是其增殖和迁移的重要因素。然而,Ski在星形胶质细胞炎症活化中的作用尚不清楚。本实验研究目的是分析Ski在星形胶质细胞介导的炎症反应中的作用,及其对星形胶质细胞活化和炎症因子释放的影响。方法:取新生3d内Sprague-Dawley大鼠大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。使用GFAP抗体进行免疫荧光染色鉴定纯度后,用1μg/ml脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导星形胶质细胞建立炎症模型,通过Western blot技术观察Ski、GFAP和iNOS蛋白表达变化,ELISA方法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6释放水平。然后将细胞分为空白对照组、阴性对照组、SkisiRNA组,观察Ski沉默后对LPS诱导星形胶质细炎症活化的影响。结果:免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞纯度大于98%,符合实验要求。给予LPS刺激星形胶质细胞后,Ski在LPS诱导的星形胶质细胞中升高,... 

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倒置显微镜下观察纯化后星形胶质细胞形态

图 1 倒置显微镜下观察纯化后星形胶质细胞形态GFAP 是星形胶质细胞的标志蛋白，因此，我们采用 GFAP 免疫荧光染色检测星形胶质细胞纯度。GFAP 阳性细胞数与总细胞数比例为星形胶质细胞纯度。如图 2 所示，星形胶质细胞纯度达到 98%以上，符合实验的要求。

硕士学位论文 Ski 在大鼠星形胶质细胞炎症活化中S 诱导星形胶质细胞 Ski 表达了研究 LPS 对星形胶质细胞中 Ski 表达的影响，本实验中，我们形胶质细胞。如图 3 所示，1μg/ml LPS 作用于星形胶质细胞 0hh 后，Westernblot 结果提示，LPS 刺激星形胶质细胞 3h 后 Sk低；刺激 6 h 后, Ski 表达逐渐升高；在 12h 时，Ski 表达明显升达达高峰。

【参考文献】：
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本文编号：3609431