骨癌痛大鼠脊髓中M-CSF对痛觉过敏作用机制的研究

发布时间：2022-02-11 09:21

　　目的建立大鼠骨癌痛（bone cancer pain,骨癌痛）模型,检测骨癌痛大鼠脊髓M-CSF的表达,并初步探讨M-CSF对骨癌痛痛觉敏化影响的作用机制,以期为骨癌痛的治疗方法提供新的理论依据。方法1.制备胫骨注射用Walker256乳腺癌细胞取Walker256乳腺癌细胞（上海素冉生物科技有限公司）腹腔注射入150¹80g的健康成年雄性SD大鼠。每日观察大鼠腹部种植乳腺癌细胞的变化,5⁷天后形成腹水并抽取。用PBS溶液漂洗并离心（转数800r/min）抽取的腹水3次,每次离心5min。制备好的癌细胞置于冰块上。2.实验动物重约170²10g的健康成年雄性SD大鼠（济南鹏越有限责任公司）,于24±0.5℃室温下,昼夜各12小时自由饮食喂养。3.鞘內置管与之前的研究报道相同,在大鼠注入麻醉剂后,将PE-10导管置于蛛网膜下腔腰膨大位置。4.骨癌痛大鼠模型的制备参考既往骨癌痛模型的相关研究,取鞘內置管成功的大鼠并将Walker256乳腺癌细胞（10ul 5X10⁶细胞/毫升）注入大鼠右侧胫骨上端骨髓腔... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验分组
            1.2.1 骨癌痛模型的建立
            1.2.2 M-CSF、Iba1和P2X4R在大鼠骨癌痛模型脊髓中的表达
            1.2.3 M-CSF受体阻断剂对大鼠骨癌痛的影响
        1.3 实验仪器
        1.4 实验试剂和耗材
    2 试验方法
        2.1 Walker256 乳腺癌细胞的复苏与培养
        2.2 制备大鼠骨癌痛模型
        2.3 鞘内置管
        2.4 机械痛阈值测试
        2.5 Western Blot
            2.5.1 组织取材
            2.5.2 Western Blot步骤
        2.6 免疫荧光
            2.6.1 组织取材
            2.6.2 免疫荧光方法
    3 统计分析
结果
    1 骨癌痛模型建立后大鼠机械缩足反应阈值的变化
    2 骨癌痛模型建立后巨噬细胞集落刺激因子M-CSF在大鼠脊髓的表达情况
    3 鞘内注射巨噬细胞集落刺激因子受体阻断剂GW2580对BCP大鼠的机械缩足反应阈值的影响
    4 鞘内注射巨噬细胞集落刺激因子受体阻断剂GW2580 对大鼠脊髓小胶质细胞激活以及P2X4R表达的影响
    5 鞘內注射巨噬细胞集落刺激因子受体阻断剂GW2580 对脊髓背角小胶质细胞P2X4R表达的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3620021