新癌—卵基因SAS1B在人胃癌和甲状腺癌中表达及生物学意义研究
发布时间：2022-02-16 12:41
SAS1B（sperm acrosomal SLLP1 binding protein,SAS1B）是新发现的基因,其表达产物最先在成熟卵细胞表面发现,后来在女性有关的癌症,如子宫癌、卵巢癌中发现有表达。癌症化学疗法是临床上最常见的治疗方法,但它非特异性杀灭癌细胞的同时,正常细胞也受累。如果化疗药物仅识别癌细胞,对其特异性杀灭,无疑会给癌症患者带来福音,但寻找癌细胞表面特异性抗原的研究一直没有重大突破。SAS1B蛋白若仅表达于癌细胞表面,这势必会为癌症治疗提供强有力的靶标,但目前SAS1B基因的功能不清楚。本研究利用CRISPR/Cas9基因修饰、基因克隆、流式细胞术、实时荧光定量PCR、Western Blot、免疫组化染色、蛋白纯化、抗体制备、ELISA等技术对人肿瘤组织、胃癌细胞系、小鼠胚胎及成体组织的SAS1B基因开展多角度、全方位、深层次研究,旨在揭示SAS1B基因的生物学意义,为抗癌药物的研制、肿瘤早期诊断以及生殖医学提供翔实依据。（1）采用基因克隆技术构建pET-22b-SAS1B原核表达质粒,转化BL21（DE3）细胞,并通过AKTA pure 25蛋白纯化仪和Mill...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１人卵巢成熟卵细胞ＳＡＳ１Ｂ表达??Ｆｉｇ．?１?ＳＡＳ１Ｂ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｏｖａｒｉａｎ?ｍａｔｕｒｅ?ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ?ｃｅｌｌｓ??
?新癌－卵基因ＳＡＳ１Ｂ在人胃癌和甲状腺癌中表达及生物学意义研究?３??细胞，然后利用细胞膜的胞吞作用将荷载药物递送到细胞内部，ＳＡＳ１Ｂ抗体复合物在??癌细胞内开始内化过程。而在这个过程中，细胞表面没有ＳＡＳ１Ｂ抗原的细胞则不会被??ＳＡＳ１Ｂ抗体药物“盯上”，载荷有毒药物ＳＡＳ１Ｂ抗体复合物的释放会触发癌细胞的内??部生物化学变化甚至导致死亡。癌细胞表面的ＳＡＳ１Ｂ蛋白作为靶向药物的“接收器”??可能会降低传统癌症治疗的副作用。特别是对于女性卵巢癌症患者来说更是福音，??ＳＡＳ１Ｂ抗体药物只会攻击癌细胞和生长中的卵细胞，对保留女性生育能力具有重要意??义。??也?｛??Ｎ愈??图１人卵巢成熟卵细胞ＳＡＳ１Ｂ表达??Ｆｉｇ．?１?ＳＡＳ１Ｂ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｏｖａｒｉａｎ?ｍａｔｕｒｅ?ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ?ｃｅｌｌｓ??■■■国??图２鼠卵细胞膜上ＳＡＳ１Ｂ蛋白（红色）表达??Ｆｉｇ．２?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳ１Ｂ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｎ?ｍｏｕｓｅ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｍｂｒａｎｅ?（ｒｅｄ）??我国还没有开展ＳＡＳ１Ｂ新抗原在癌症方面的治疗，当然ＳＡＳ１Ｂ基因的性质和??功能在国际上研究得还不清楚。ＳＡＳ１Ｂ基因，从其名可知与精子的顶体反应有关，??也就是与受精作用密切相关。ＳＡＳ１Ｂ蛋白在成熟卵细胞中表达，在体细胞中是处??于关闭状态的，为什么在癌症中会出现ＳＡＳ１Ｂ蛋白表达呢，机制不清楚，ＳＡＳ１Ｂ??
?新癌－卵基因ＳＡＳ１Ｂ在人胃癌和甲状腺癌中表达及生物学意义研究?５??意义重大，而且显示出巨大商机，同时也为以后开发睾－新癌抗原的研宄提供更宽广??的视野。??目前局限的研宄结果显示，ＳＡＳ１Ｂ大多位于细胞的表面，它的出现说明细胞进??入高度増殖状态，在正常成体细胞是关闭的，为什么在肿瘤细胞中发现重新开启表??达呢？重新启动后导致正常体细胞变成癌细胞的调节模式是什么呢，这些还是未知??数。２０１８年有关胰腺癌的文献报道显示ＳＡＳ１Ｂ的表达可在胞浆，多数在细胞膜上??表达（见图４）?［６１］，而在２０１５年文献报道子宫来源的癌细胞中发现ＳＡＳ１Ｂ在细胞??质中表达（见图５严］，ＳＡＳ１Ｂ在不同细胞中表达的部位不一样，显示ＳＡＳ１Ｂ功能??非常复杂，目前我们对ＳＡＳ１Ｂ功能的揭示只是冰山一角，所以对其研究迫在眉睫。??Ｌｉｖｅ／Ｎｏｎ－ｐｅｒｍｅａｙｉａｃ??＿??，１—＿??ｊＩＨＬ??图４胰腺癌细胞系ＳＡＳ１Ｂ中表达（绿色）??Ｆｉｇ．４?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅ?ＳＡＳ１Ｂ?（ｇｒｅｅｎ）??根据文献和我们前期研究结果建立如下假说：ＳＡＳ１Ｂ是细胞具有多项分化潜能??的标志性蛋白质，它的开启使细胞具有全能性，而ＳＡＳ１Ｂ蛋白的关闭预示细胞开始??向终末分化。癌细胞ＳＡＳ１Ｂ蛋白的重启应当模式使它具有“返祖现象”，具有分化??的潜能。内分泌系统疾病受内环境的影响，像子宫癌、卵巢癌等受雌激素、孕激素??等影响，所以表观遗传修饰可能在ＳＡＳ１Ｂ基因重启应答模式中发挥重要作用。甲状??腺癌属于内分泌系统肿瘤，高恶性的未分化甲状腺癌病人在临床上往往发现疾病时
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲状腺癌组织中MSH6和P53蛋白表达的临床意义[J]. 于建,杨勇,吴娜,何源哈达,李磊,苗喜梅,于红梅,杨晨,杨宏新. 内蒙古医学杂志. 2019(05)
[2]纳尔逊海湾病毒S3蛋白纯化及大鼠多克隆抗体制备[J]. 王晓芳,陈江曼,陶晓莉,窦丽丽,佟伟,赵微,刘念,李永刚. 细胞与分子免疫学杂志. 2019(05)
[3]胃癌靶向治疗的现状与思考[J]. 李丹妮,刘静,刘云鹏. 实用肿瘤杂志. 2019(02)
[4]兔抗人copine-8蛋白多克隆抗体的制备[J]. 张昭颖,李游,游金,彭杰夫,卢洁,卢春花. 细胞与分子免疫学杂志. 2018(05)
[5]中国甲状腺癌的流行现状和影响因素[J]. 董芬,张彪,单广良. 中国癌症杂志. 2016(01)
[6]晚期胃癌分子靶向治疗研究现状[J]. 赵鹏飞,曹邦伟. 临床与病理杂志. 2015(08)
硕士论文
[1]BARD1基因敲除与过表达对人真核细胞中Aurora-A、BRCA1与p53表达影响[D]. 于建.内蒙古医科大学 2019
[2]RNase R在大肠杆菌的表达和条件优化[D]. 李轲.华南理工大学 2019
[3]口蹄疫病毒3C蛋白多克隆抗体的制备与鉴定[D]. 陈飞.山东农业大学 2018
本文编号：3627985
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１人卵巢成熟卵细胞ＳＡＳ１Ｂ表达??Ｆｉｇ．?１?ＳＡＳ１Ｂ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｏｖａｒｉａｎ?ｍａｔｕｒｅ?ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ?ｃｅｌｌｓ??
?新癌－卵基因ＳＡＳ１Ｂ在人胃癌和甲状腺癌中表达及生物学意义研究?３??细胞，然后利用细胞膜的胞吞作用将荷载药物递送到细胞内部，ＳＡＳ１Ｂ抗体复合物在??癌细胞内开始内化过程。而在这个过程中，细胞表面没有ＳＡＳ１Ｂ抗原的细胞则不会被??ＳＡＳ１Ｂ抗体药物“盯上”，载荷有毒药物ＳＡＳ１Ｂ抗体复合物的释放会触发癌细胞的内??部生物化学变化甚至导致死亡。癌细胞表面的ＳＡＳ１Ｂ蛋白作为靶向药物的“接收器”??可能会降低传统癌症治疗的副作用。特别是对于女性卵巢癌症患者来说更是福音，??ＳＡＳ１Ｂ抗体药物只会攻击癌细胞和生长中的卵细胞，对保留女性生育能力具有重要意??义。??也?｛??Ｎ愈??图１人卵巢成熟卵细胞ＳＡＳ１Ｂ表达??Ｆｉｇ．?１?ＳＡＳ１Ｂ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｏｖａｒｉａｎ?ｍａｔｕｒｅ?ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ?ｃｅｌｌｓ??■■■国??图２鼠卵细胞膜上ＳＡＳ１Ｂ蛋白（红色）表达??Ｆｉｇ．２?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳ１Ｂ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｎ?ｍｏｕｓｅ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｍｂｒａｎｅ?（ｒｅｄ）??我国还没有开展ＳＡＳ１Ｂ新抗原在癌症方面的治疗，当然ＳＡＳ１Ｂ基因的性质和??功能在国际上研究得还不清楚。ＳＡＳ１Ｂ基因，从其名可知与精子的顶体反应有关，??也就是与受精作用密切相关。ＳＡＳ１Ｂ蛋白在成熟卵细胞中表达，在体细胞中是处??于关闭状态的，为什么在癌症中会出现ＳＡＳ１Ｂ蛋白表达呢，机制不清楚，ＳＡＳ１Ｂ??
?新癌－卵基因ＳＡＳ１Ｂ在人胃癌和甲状腺癌中表达及生物学意义研究?５??意义重大，而且显示出巨大商机，同时也为以后开发睾－新癌抗原的研宄提供更宽广??的视野。??目前局限的研宄结果显示，ＳＡＳ１Ｂ大多位于细胞的表面，它的出现说明细胞进??入高度増殖状态，在正常成体细胞是关闭的，为什么在肿瘤细胞中发现重新开启表??达呢？重新启动后导致正常体细胞变成癌细胞的调节模式是什么呢，这些还是未知??数。２０１８年有关胰腺癌的文献报道显示ＳＡＳ１Ｂ的表达可在胞浆，多数在细胞膜上??表达（见图４）?［６１］，而在２０１５年文献报道子宫来源的癌细胞中发现ＳＡＳ１Ｂ在细胞??质中表达（见图５严］，ＳＡＳ１Ｂ在不同细胞中表达的部位不一样，显示ＳＡＳ１Ｂ功能??非常复杂，目前我们对ＳＡＳ１Ｂ功能的揭示只是冰山一角，所以对其研究迫在眉睫。??Ｌｉｖｅ／Ｎｏｎ－ｐｅｒｍｅａｙｉａｃ??＿??，１—＿??ｊＩＨＬ??图４胰腺癌细胞系ＳＡＳ１Ｂ中表达（绿色）??Ｆｉｇ．４?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅ?ＳＡＳ１Ｂ?（ｇｒｅｅｎ）??根据文献和我们前期研究结果建立如下假说：ＳＡＳ１Ｂ是细胞具有多项分化潜能??的标志性蛋白质，它的开启使细胞具有全能性，而ＳＡＳ１Ｂ蛋白的关闭预示细胞开始??向终末分化。癌细胞ＳＡＳ１Ｂ蛋白的重启应当模式使它具有“返祖现象”，具有分化??的潜能。内分泌系统疾病受内环境的影响，像子宫癌、卵巢癌等受雌激素、孕激素??等影响，所以表观遗传修饰可能在ＳＡＳ１Ｂ基因重启应答模式中发挥重要作用。甲状??腺癌属于内分泌系统肿瘤，高恶性的未分化甲状腺癌病人在临床上往往发现疾病时
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲状腺癌组织中MSH6和P53蛋白表达的临床意义[J]. 于建,杨勇,吴娜,何源哈达,李磊,苗喜梅,于红梅,杨晨,杨宏新. 内蒙古医学杂志. 2019(05)
[2]纳尔逊海湾病毒S3蛋白纯化及大鼠多克隆抗体制备[J]. 王晓芳,陈江曼,陶晓莉,窦丽丽,佟伟,赵微,刘念,李永刚. 细胞与分子免疫学杂志. 2019(05)
[3]胃癌靶向治疗的现状与思考[J]. 李丹妮,刘静,刘云鹏. 实用肿瘤杂志. 2019(02)
[4]兔抗人copine-8蛋白多克隆抗体的制备[J]. 张昭颖,李游,游金,彭杰夫,卢洁,卢春花. 细胞与分子免疫学杂志. 2018(05)
[5]中国甲状腺癌的流行现状和影响因素[J]. 董芬,张彪,单广良. 中国癌症杂志. 2016(01)
[6]晚期胃癌分子靶向治疗研究现状[J]. 赵鹏飞,曹邦伟. 临床与病理杂志. 2015(08)
硕士论文
[1]BARD1基因敲除与过表达对人真核细胞中Aurora-A、BRCA1与p53表达影响[D]. 于建.内蒙古医科大学 2019
[2]RNase R在大肠杆菌的表达和条件优化[D]. 李轲.华南理工大学 2019
[3]口蹄疫病毒3C蛋白多克隆抗体的制备与鉴定[D]. 陈飞.山东农业大学 2018
本文编号：3627985
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3627985.html
最近更新
教材专著
