FGF-2/PELA/BMP-2微囊支架促进大鼠骨膜来源干细胞的成骨分化

发布时间：2022-08-01 20:32

　　目的观察成纤维细胞生长因子-2/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸/骨形态发生蛋白-2（FGF-2/PELA/BMP-2）微囊支架对SD大鼠骨膜来源干细胞成骨分化作用。方法提取SD大鼠骨膜来源干细胞（PDSC）,进行流式细胞学表面标记物鉴定及成骨、成软骨、成脂三系诱导并进行茜素红、甲苯胺蓝、阿利新蓝、油红O染色及免疫荧光实验。制备FGF-2/PELA/BMP-2、FGF-2/PELA、PELA/BMP-2、PELA四组材料,进行扫描电镜（SEM）观察微囊表面,通过ELISA实验制作两因子的控释曲线。将4组材料浸提液与第3代骨膜来源干细胞进行共培养,分别在7、14 d进行碱性磷酸酶（AKP）活性检测,分别在7、14、21 d进行q RT-PCR成骨基因表达检测,观察比较各组PDSC成骨分化能力,数据汇总后进行统计学分析。结果流式细胞学表面标记物鉴定显示PDSC表达间充质干细胞表面标记物,三系诱导分化染色结果表面PDSC具有成骨、成软骨、成脂等多向分化能力。AKP活性结果显示,FGF-2/PELA/BMP-2组在PDSC培养的7 d及14 d,AKP活性最高,差异显著。FGF-2/PELA/BMP-... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 PDSC的分离、培养
    1.2 PDSC的流式细胞学检测
    1.3 PDSC细胞骨架免疫荧光及成骨、成软骨、成脂诱导分化实验
    1.4 PELA微囊支架制备
    1.5 FGF-2/PELA/BMP-2微囊支架体外释放检测
    1.6 支架浸提液促进PDSC成骨分化实验
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 PDSC原代培养及流式鉴定结果:
    2.2 PDSC细胞骨架免疫荧光及三系诱导结果
    2.3 扫描电镜观察微囊支架及荧光显微镜观察模型微囊结果
    2.4 体外BMP-2/FGF-2释放研究
    2.5 AKP活性检测结果
    2.6 q RT-PCR成骨基因表达结果
3 讨论



本文编号：3668131