营养物对杜兴肌肉萎缩症小鼠的作用研究

发布时间：2022-10-03 16:16

　　杜兴肌肉萎缩症（Duchenne Muscular Dystrophy,DMD）是一种伴X染色体连锁隐性遗传的影响神经和肌肉的系统性疾病,主要发病原因为DMD基因突变引起dystrophin蛋白缺失,肌肉细胞膜发生破损,肌肉出现进行性退化,导致病人死亡,DMD病人的平均寿命约为20岁。目前对DMD缺乏有效的治疗手段,唯一被批准用于临床的反义寡核苷酸药物PMO（phosphorodiamidate morpholino oligomers）存在系统运输效率低、用药量大、价格昂贵等问题。针对这些问题,我们利用DMD疾病模型mdx小鼠筛选营养物,以期获得能够促进PMO活性及改善DMD病理的新型佐剂。基于课题组前期的局部筛选结果,本论文选择了局部筛选效果较好的三种营养物（A1-A3）,在mdx小鼠上系统评估这三种营养物对PMO活性的作用及对肌肉组织形态、炎症、纤维化、新生和退化进程等的影响;为进一步明确候选营养物的长期有效性及安全性,我们在mdx小鼠上进行了较为长期的系统研究,以期为其临床应用提供试验依据和理论基础。测试结果表明,在成年mdx小鼠上,通过尾静脉系统注射营养物A1和25mg/kg... 

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
对象和方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 主要仪器设备
        1.1.3 实验试剂及耗材
        1.1.4 主要分析工具软件
    1.2 实验方法
        1.2.1 试剂配制
        1.2.2 动物注射
        1.2.3 组织蛋白提取与检测
        1.2.4 组织RNA提取
        1.2.5 组织免疫荧光染色(dystrophin蛋白)
        1.2.6 组织免疫荧光染色(nNOS蛋白)
        1.2.7 新生肌肉纤维e MyHC染色
        1.2.8 免疫球蛋白染色(IgG)
        1.2.9 肌肉病理状态检测-苏木素&伊红染色(H&E staining)
        1.2.10 免疫炎性细胞检测(CD68+巨噬细胞)
        1.2.11 抓力及体重检测
        1.2.12 血清检测
        1.2.13 跑轮实验
        1.2.14 胶原染色(Masson’s trichrome staining)
        1.2.15 肝肾组织石蜡切片
        1.2.16 石蜡组织切片H&E染色
        1.2.17 定量分析蛋白表达水平
        1.2.18 统计学分析
结果
2.1 在mdx小鼠上对营养物A1 促进PMO的活性研究
    2.1.1 PMO-A1对mdx小鼠肌肉中dystrophin恢复的效果测试
    2.1.2 PMO-A1对mdx小鼠肌肉病理状态的影响
2.2 在mdx小鼠上对营养物A2 促进PMO的活性研究
    2.2.1 PMO-A2对mdx小鼠肌肉dystrophin恢复效果的测试
    2.2.2 PMO-A2对mdx小鼠肌肉的病理改善作用研究
    2.2.3 对A2 使用剂量的优化探究
2.3 在mdx小鼠上对营养物A3 促进PMO的活性研究
    2.3.1 PMO-A3对mdx小鼠肌肉dystrophin恢复的效果测试
    2.3.2 PMO-A3 给药方案的优化
    2.3.3 优化后PMO-A3对mdx小鼠肌肉病理改善作用
2.4 营养物A3对mdx小鼠的作用效果探究
    2.4.1 营养物A3对mdx小鼠肌肉组织病理的改善作用
    2.4.2 营养物A3对mdx小鼠长期治疗效果研究
讨论
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 杜兴肌肉萎缩症病理改善的治疗研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3684392