基质硬度通过MRTF-A调控骨肉瘤细胞的上皮间质转化及其机制的研究

发布时间：2022-11-04 23:47

　　目的:1.制作不同硬度的生物相容性丙烯酰胺水凝胶及测试其力学性能;2.探明MRTF-A在不同硬度梯度条件下对骨肉瘤MG63细胞的上皮间质转化现象的影响;3.验证基质硬度通过MRTF-A调控骨肉瘤MG63细胞上皮间质转化的具体信号通路及机制。方法:1.合成不同硬度的聚丙烯酰胺水凝胶,并用Instron万能力学测试仪进行检测确认;通过CCK8法检测水凝胶对细胞增殖的影响;通过光镜和荧光显微镜观察细胞形态变化,确认水凝胶体系的建立和可重复性。2.通过钙黄绿素染色定量细胞圆度的变化,同时使用免疫荧光确认细胞骨架的重塑和MRTF-A的核转位;通过蛋白印迹实验检测不同硬度下MRTF-A及EMT的各蛋白和转录因子的改变,同时在使用MRTF-A抑制剂干预后观察其核转位及各蛋白和转录因子的变化,从而了解MRTF-A在骨肉瘤细胞EMT过程中发挥的作用;使用细胞刮痕实验及蛋白印迹实验确认骨肉瘤EMT现象在不同硬度及抑制剂干预下的变化。3.通过蛋白印迹实验检测基质硬度通过MRTF-A调控EMT现象的信号通路,并验证基质硬度与经典TGF-β/Smad信号通路之间的关系。结果:1.聚丙烯酰胺水凝胶可以通过丙烯酰胺... 

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

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华中科技大学博士学位论文创新点概述
中文摘要
ABSTRACT
第一部分 不同硬度梯度生物相容性聚丙烯酰胺水凝胶体系的构建
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 细胞外基质硬度通过MRTF-A调节骨肉瘤细胞的上皮间质转化现象
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分 MRTF-A调控骨肉瘤细胞上皮间质转化的机制研究
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
总结
综述
    参考文献
附录一 英文缩略词表
附录二 攻读博士学位期间发表的论文以及参与的课题
致谢



本文编号：3701554