重组PTD-Cu/Zn SOD对骨癌痛的作用及机制研究

发布时间：2022-11-10 20:42

　　目的:骨癌痛（Bone cancer pain,BCP）是癌症患者的严重并发症,由于目前缺乏有效的控制手段,因此骨癌痛是目前困扰医生和患者的重要临床问题。活性氧（Reactive oxygen species,ROS）是导致癌性疼痛的重要因素,而新型重组融合蛋白PTD-Cu/Zn SOD在前期试验中被证明具有很好的抗氧化作用,因此该课题欲探究PTD-Cu/Zn SOD对骨癌痛的作用及可能的机制。方法:选取180-220 g的雌性SPF级SD大鼠,随机分为对照组（Sham）、骨肿瘤组（Carcinoma）、生理盐水对照组（Ca+NS）、阴性对照病毒组（Ca+LV-NC）、PTD-Cu/Zn SOD组（Ca+PTD-SOD）、Prdx4过表达病毒组（Ca+LV-Prdx4）。通过向右侧胫骨骨髓腔内接种Walker256大鼠乳腺癌细胞（5×107个/mL）构建骨癌痛模型,Sham组大鼠接种煮沸处理的肿瘤细胞,另五组接种正常肿瘤细胞;Ca+NS组和Ca+PTD-SOD组大鼠通过鞘内置管分别注射生理盐水（20mL）和融合蛋白PTD-Cu/Zn SOD（15mg/20mL）,于腿部接种肿瘤细胞后第... 

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
主要英文缩略词表
一、引言
二、材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 仪器资料
        2.1.3 细胞
        2.1.4 动物
    2.2 方法
        2.2.1 原代神经元培养
        2.2.2 慢病毒的载体构建与验证
        2.2.3 骨癌痛模型的建立
        2.2.4 重组PTD-Cu/Zn SOD构建及鞘内应用
        2.2.5 慢病毒脊髓内注射
        2.2.6 疼痛行为检测
        2.2.7 取材及标本处理
        2.2.8 大鼠胫骨HE染色
        2.2.9 组织过氧化氢检测
        2.2.10 Western blot
        2.2.11 荧光定量PCR
        2.2.12 免疫组化检测
        2.2.13 数据分析
三、结果
    3.1 成功构建骨癌痛模型
    3.2 PTD-Cu/Zn SOD可明显缓解骨癌痛
    3.3 成功构建Prdx4过表达慢病毒
    3.4 Prdx4在骨癌痛大鼠的脊髓背角的表达下调
    3.5 下调Prdx4促进骨癌痛的发生
    3.6 在骨癌痛中PTD-Cu/Zn SOD可使Prdx4表达上调
    3.7 PTD-Cu/Zn SOD和Prdx4降低骨癌痛大鼠脊髓中H2O2的含量
    3.8 PTD-Cu/Zn SOD和Prdx4可调节神经递质受体的激活
四、讨论
五、结论
六、参考文献
七、文献综述
    参考文献
八、附录
九、致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]基于脊髓层面的骨癌痛发生机制[J]. 杜俊英,房军帆,梁宜,吴赛飞,陈宜恬,方剑乔.  中国肿瘤. 2014(10)
[2]骨癌痛大鼠初级感觉神经元兴奋性的研究[J]. 郑琴,方东,刘敏,姜红,蔡捷,万有,邢国刚.  中国疼痛医学杂志. 2011(03)
[3]骨癌痛外周机制研究进展[J]. 王小微,毛应启梁,王彦青.  国际病理科学与临床杂志. 2008(05)



本文编号：3705265