新型器官保存液的研制及其对大鼠肺脏低温保存的效果研究

发布时间：2022-12-09 02:43

　　背景:器官保存液与缺血再灌注损伤及维持器官活性密切相关。Perfadex是一种有效的、也是目前应用最广的肺保存液。但是,其总体肺保存时间有限（≤12小时）,并且其术后原发性移植物失功（primary graft dysfunction,PGD）的几率达10-20%。此外,其昂贵的价格也限制了其在国内移植领域的广泛应用。所以,研制一种新型的经济有效的器官保存液势在必行。方法:将肺上皮细胞（BEAS-2B）或肺微血管内皮细胞（HPMEC）培养至80-90%融合,去除细胞培养基,分别加入不同的待测保存液,如Perfadex,PBS,0.9%Na Cl,Steen液,DMEM,DMEM+10%FBS等,然后将细胞置入4℃充满50%O2（含或不含5%CO2）的细胞冷冻箱中来模拟冷缺血过程。18 h或42 h后,将细胞分别转回到37℃常规细胞培养基环境来模拟再灌注过程,再灌注4 h。随后,应用MTS测验来评估细胞活性。我们以传统的细胞培养基营养成份搭配为基础,研制成新型的器官保存液JT-1,并将其在大鼠肺冷缺血模型上进行验证,大鼠肺脏在不同的保存液中低温（4℃）保存24 h后,采集标本并进行检测及... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文缩略词对照表
第1章 文献综述
    1 器官移植的历史及国内外肺移植现状
        1.1 器官移植的起源和早期尝试
        1.2 国内外肺移植现状
    2 器官保存损伤的机制
    3 器官保存技术
        3.1 静态冷保存
        3.2 器官保存液
        3.3 体外肺灌注技术（ex vivo lung perfusion, EVLP）
        3.4 常用的体外肺灌注液
    4 结论
    参考文献
第2章 新型器官保存液的研制、筛选和优化
    2.1 研究背景
    2.2 缺血再灌注损伤细胞模型的建立
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验方法
    2.3 器官保存液的成分筛选和优化（细胞再灌注损伤模型）
        2.3.1 实验材料
        2.3.2 实验方法
        2.3.3 研究结果
        2.3.4 研究结论
    2.4 新型器官保存液JT-1 对细胞缺血再灌注损伤的保护作用
        2.4.1 新型器官保存液的配制
        2.4.2 定性分析
        2.4.3 稳定性
        2.4.4 新型器官保存液对细胞缺血再灌注损伤的保护作用
    2.5 小结
第3章 新型器官保存液JT-1 对大鼠肺脏低温保存的效果评价
    3.1 研究背景
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验动物和分组
        3.2.2 实验所需仪器设备
        3.2.3 肺获取和保存
        3.2.4 肺组织标本的采集
        3.2.5 标本的处理及观察指标
        3.2.6 统计学分析
    3.3 实验结果
    3.4 小结
第4章 结论
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3714653