过表达sFgl2的MSCs调节巨噬细胞抑制小鼠心脏移植急性排斥反应研究

发布时间：2022-12-17 09:40

　　研究背景:器官移植仍然是器官功能衰竭最有效的治疗方法,为了提高移植器官的存活时间,新的技术及免疫抑制剂的开发是主要的研究方向。然而,即使免疫抑制剂已经广泛应用,急性排斥反应（acute rejection,AR）仍是影响接受器官移植患者存活的主要障碍之一。而且,器官移植后长期使用免疫抑制剂通常会引起全身性的副作用,严重影响受者的长期存活与生活质量。寻求替代的抗排斥疗法来减少,甚至避免使用免疫抑制剂是一直以来的研究热点。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）具有低抗原性,可塑性强,向炎症部位聚集等特点,目前已经成为器官移植免疫排斥细胞治疗的重要候选者之一。但是MSCs抑制免疫排斥的能力有限,并且MSCs具有多个细胞亚型,难以确定哪种亚型在免疫排斥过程中发挥关键作用。由于MSCs具有较强的可塑性,通过转染的方法增强MSCs的功能是可行的方法之一。可溶性纤维蛋白原样蛋白2（soluble fibrinogen-like protein 2,sFgl2）,是一种主要由CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺... 

【文章页数】：131 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、小鼠脂肪来源MSCs分离、培养、鉴定及转染
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验对象
        1.1.2 主要实验仪器、器材及试剂
        1.1.3 实验方法
        1.1.4 统计学方法
    1.2 结果
        1.2.1 小鼠脂肪来源的MSCs培养及鉴定
        1.2.2 成功构建带有目的基因的慢病毒载体
        1.2.3 体外转染,获得稳定表达sFgl2的MSCs
        1.2.4 转染不会影响MSCs细胞形态、表型、增殖及迁移能力
        1.2.5 第一部分实验内容汇总
    1.3 讨论
        1.3.1 间充质干细胞与移植免疫
        1.3.2 MSCs功能调节及转染
    1.4 小结
二、sFgl2-MSCs对巨噬细胞功能及分化的影响
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验对象
        2.1.2 主要实验仪器、器材及实验试剂
        2.1.3 实验方法
        2.1.4 统计学方法
    2.2 结果
        2.2.1 小鼠心脏移植排斥反应过程中,M1 比例增加,M2 比例减少
        2.2.2 SFgl2-MSCs对巨噬细胞凋亡的影响
        2.2.3 SFgl2-MSCs对巨噬细胞功能的影响
        2.2.4 抗原刺激时,sFgl2-MSCs具有更强的促进巨噬细胞表面CD206 表达,抑制CD16/32表达的能力
        2.2.5 外界抗原刺激时,sFgl2-MSCs通过JAK-STAT及 NF-κB通路影响巨噬细胞分化
        2.2.6 SFgl2-MSCs对巨噬细胞诱导T细胞分化能力的影响
        2.2.7 SFgl2-MSCs促进M2 型巨噬细胞细胞相关炎症抑制因子的表达
        2.2.8 在LPS+IFN-γ刺激条件下,共培养处理后巨噬细胞对MVEC细胞凋亡的影响
        2.2.9 第二部分结果汇总
    2.3 讨论
        2.3.1 巨噬细胞是参与急性免疫排斥反应的重要细胞
        2.3.2 巨噬细胞与T细胞的相互作用
        2.3.3 巨噬细胞与组织损伤
    2.4 小结
三、sFgl2-MSCs可以缓解小鼠心脏移植模型急性排斥反应
    3.1 对象和方法
        3.1.1 实验对象
        3.1.2 主要实验仪器、器材及实验试剂
        3.1.3 实验方法
        3.1.4 统计学方法
    3.2 结果
        3.2.1 SFgl2-MSCs治疗组小鼠,心脏研磨液及血清中sFgl2 表达增高
        3.2.2 SFgl2-MSCs治疗组小鼠心脏移植物存活时间延长
        3.2.3 SFgl2-MSCs显著抑制急性排斥反应,减少巨噬细胞浸润
        3.2.4 SFgl2-MSCs治疗组中M2 型巨噬细胞比例增加,M1 型巨噬细胞比例减少
        3.2.5 SFgl2-MSCs治疗组中炎症因子水平降低,抗炎因子水平升高
        3.2.6 第三部分结果汇总
    3.3 讨论
        3.3.1 SFgl2-MSCs比 WT-MSCs有更强的抑制急性免疫排斥的功能
        3.3.2 SFgl2-MSCs治疗组小鼠脾脏中M2 型巨噬细胞比例增加,M2 型巨噬细胞相关抗炎因子增加
        3.3.3 SFgl2-MSCs治疗促进抗炎因子释放,抑制炎症因子的表达
    3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 单核-巨噬细胞与器官移植排斥的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-663在肾移植急性排斥反应中的调控作用[J]. 刘小友,张婕,梁洁,刘永光,胡建敏,姜正尧,郭泽锋.  南方医科大学学报. 2016(03)
[2]Physiological functions and clinical implications of fibrinogen-like 2:A review[J]. Genyan Yang,W Craig Hooper.  World Journal of Clinical Infectious Diseases. 2013(03)
[3]创伤失血后大鼠单核/巨噬细胞分泌功能变化的异质性及其意义[J]. 尹华华,夏浩,朱京慈,顾长国,徐发良,李磊.  中国危重病急救医学. 2006(09)



本文编号：3719698