TAMs/CXCL-1激活NF-κB/SOX4通路促进乳腺癌转移的作用和分子机制研究
发布时间：2023-02-08 08:26
目的:研究肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)分泌的CXCL-1促进乳腺癌转移的作用并阐明其相关分子机制和探讨消癖颗粒抑制乳腺癌转移的作用,为预防和治疗乳腺癌提供新策略。方法:1.通过Cytokine array实验,筛选TAMs细胞高表达的细胞因子,并利用免疫组化实验,在MMTV-Pyvt+/-转基因荷瘤小鼠中比较转移灶和原发灶中CXCL-1和转移相关指标(EMT)的表达差异。2.利用MTT实验、划痕实验、Transwell实验、明胶酶谱实验、Western blot实验探讨cxcl-1是否影响乳腺癌细胞的增殖、迁移侵袭能力。3.利用Q-PCR技术筛选出CXCL-1作用于乳腺癌细胞的靶基因,利用脂质体转染、病毒转染等沉默或重组相关基因,Western blot实验、免疫荧光等手段验证相关通路。4.在体内,活体成像技术观察TAMs分泌的CXCL-1对Nod-scid小鼠肺转移的作用,观察小鼠乳腺癌肿瘤生长的作用,免疫荧光和免疫组化技术观察相关蛋白的表达。5.人乳腺癌组织芯片验证CXCL-1与乳腺癌病人生存期等的关系。6.通过Cytokine array实验,验证消癖颗粒的作用靶点。7.划痕实验...
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究和研究背景
1.1 乳腺癌的研究现状
1.1.1 流行病学及病因学研究
1.1.2 临床症状及检查
1.1.3 治疗现状
1.1.3.1 外科治疗
1.1.3.2 非手术治疗
1.2 肿瘤微环境和肿瘤巨噬细胞与肿瘤的关系
1.3 细胞因子与肿瘤的关系
1.4 CXCL1与乳腺癌转移相关机制的研究
1.5 消癖颗粒的研究基础
第二章 材料和方法
2.1 实验材料和仪器
2.1.1 细胞系
2.1.2 实验动物和中药
2.1.3 主要试剂及耗材
2.1.4 仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 体外实验
2.2.1.1 细胞培养
2.2.1.2 western blot
2.2.1.3 细胞因子阵列实验Cytokin array assay
2.2.1.4 明胶酶谱实验
2.2.1.5 划痕实验
2.2.1.6 Transwell实验
2.2.1.7 免疫荧光、激光共聚焦
2.2.1.8 细胞流式
2.2.1.9 q-PCR
2.2.1.10 细胞转染
2.2.1.10.1 病毒转染
2.2.1.10.2 脂质体转染
2.2.1.10.3 siRNA瞬转
2.2.1.10.4 MTT增殖实验
2.2.1.11 消癖颗粒制备
2.2.2 体内实验
2.2.2.1 动物造模
2.2.2.2 HE染色
2.2.2.3 免疫组化、免疫荧光
第三章 实验结果
3.1 TAMs高表达CXCL1且肺转移灶中CXCL1高表达
3.1.1 TAMs中高表达CXCL1
3.1.2 转基因小鼠模型中肺转移灶CXCL1表达显著增强
3.2 CXCL1介导乳腺癌转移的作用
3.2.1 CXCL1促进鼠源乳腺癌细胞转移
3.2.2 CXCL1促进人乳腺癌转移
3.3 SOX4可能是乳腺癌转移中CXCL1最重要的下游靶点
3.4 CXCL1通过SOX4影响乳腺癌转移
3.5 CXCL1介导NF-Kb/SOX4通路影响乳腺癌转移相关指标
3.6 TAMs-CXCL1对Nod-scid小鼠乳腺癌原位瘤和肺转移瘤的影响
3.6.1 TAMs-CXCL1促进小鼠乳腺癌原位瘤作用
3.6.2 TAMs-CXCLl促进小鼠肺转移
3.7 临床分析
3.7.1 CXCL1影响术后病人的生存期
3.7.2 CXCL1对临床指标的影响
3.8 消癖颗粒通过TAMS/CXCL1抑制乳腺癌的转移侵袭能力
3.8.1 消癖颗粒的作用靶点是TAMs/CXCL1
3.8.2 消癖颗粒抑制乳腺癌转移侵袭能力
第四章 讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
统计学审核证明
本文编号：3737663
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究和研究背景
1.1 乳腺癌的研究现状
1.1.1 流行病学及病因学研究
1.1.2 临床症状及检查
1.1.3 治疗现状
1.1.3.1 外科治疗
1.1.3.2 非手术治疗
1.2 肿瘤微环境和肿瘤巨噬细胞与肿瘤的关系
1.3 细胞因子与肿瘤的关系
1.4 CXCL1与乳腺癌转移相关机制的研究
1.5 消癖颗粒的研究基础
第二章 材料和方法
2.1 实验材料和仪器
2.1.1 细胞系
2.1.2 实验动物和中药
2.1.3 主要试剂及耗材
2.1.4 仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 体外实验
2.2.1.1 细胞培养
2.2.1.2 western blot
2.2.1.3 细胞因子阵列实验Cytokin array assay
2.2.1.4 明胶酶谱实验
2.2.1.5 划痕实验
2.2.1.6 Transwell实验
2.2.1.7 免疫荧光、激光共聚焦
2.2.1.8 细胞流式
2.2.1.9 q-PCR
2.2.1.10 细胞转染
2.2.1.10.1 病毒转染
2.2.1.10.2 脂质体转染
2.2.1.10.3 siRNA瞬转
2.2.1.10.4 MTT增殖实验
2.2.1.11 消癖颗粒制备
2.2.2 体内实验
2.2.2.1 动物造模
2.2.2.2 HE染色
2.2.2.3 免疫组化、免疫荧光
第三章 实验结果
3.1 TAMs高表达CXCL1且肺转移灶中CXCL1高表达
3.1.1 TAMs中高表达CXCL1
3.1.2 转基因小鼠模型中肺转移灶CXCL1表达显著增强
3.2 CXCL1介导乳腺癌转移的作用
3.2.1 CXCL1促进鼠源乳腺癌细胞转移
3.2.2 CXCL1促进人乳腺癌转移
3.3 SOX4可能是乳腺癌转移中CXCL1最重要的下游靶点
3.4 CXCL1通过SOX4影响乳腺癌转移
3.5 CXCL1介导NF-Kb/SOX4通路影响乳腺癌转移相关指标
3.6 TAMs-CXCL1对Nod-scid小鼠乳腺癌原位瘤和肺转移瘤的影响
3.6.1 TAMs-CXCL1促进小鼠乳腺癌原位瘤作用
3.6.2 TAMs-CXCLl促进小鼠肺转移
3.7 临床分析
3.7.1 CXCL1影响术后病人的生存期
3.7.2 CXCL1对临床指标的影响
3.8 消癖颗粒通过TAMS/CXCL1抑制乳腺癌的转移侵袭能力
3.8.1 消癖颗粒的作用靶点是TAMs/CXCL1
3.8.2 消癖颗粒抑制乳腺癌转移侵袭能力
第四章 讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
统计学审核证明
本文编号：3737663
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3737663.html
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