肥胖相关骨性关节炎软骨NLRP3/caspase-1/IL-1β轴的活化及白藜芦醇效应研究

发布时间：2023-02-10 18:15

　　目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖相关骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)小鼠关节软骨NLRP3/caspase-1/IL-1β轴的变化情况及白藜芦醇(Resveratrol,RES)处理对该轴的效应,为肥胖相关OA的营养防治提供理论依据。方法:SW1353软骨肉瘤细胞系购于中国科学院上海生科院细胞资源中心,使用DMEM完全培养基、37℃、5%CO₂、饱和湿度条件下的培养箱中培养并根据需要用IL-1β及RES进行处理,分组为:DMSO(含2‰DMSO)组、IL-1β(10ng/mL)组、IL-1β(10ng/mL)+RES(50μmol/L)组;C57BL/6小鼠由中国医科大学动物实验中心提供,高脂喂养同时采用溶于0.5%羧甲基纤维素钠(Carboxymethylcellulose sodium,CMC)的RES(45 mg/kg/d)悬浊液灌胃,分组为:ND(0.5%CMC水溶液灌胃)组、HFD(0.5%CMC水溶液灌胃)组、HFD+RES(0.5%CMC水溶液与RES悬浊液灌胃)组。Western blot法检测细胞中NLPR3、caspase-1及IL...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞系来源
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要仪器
        2.1.5 试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 SW1353 细胞培养
        2.2.2 细胞处理
        2.2.3 细胞蛋白提取
        2.2.4 Western blot法检测细胞中NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表达水平
        2.2.5 动物分组及处理
        2.2.6 动物饲料成分
        2.2.7 动物样品采集和处理
        2.2.8 软骨组织形态学检查
        2.2.9 软骨NLRP3、caspase-1及IL-1βmRNA表达
        2.2.10 软骨NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表达
    2.3 数据分析
3 结果
    3.1 IL-1β处理SW1353 细胞对NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表达的影响以及RES的效应
    3.2 实验期间各组小鼠体重、体脂比及摄食量变化情况
    3.3 高脂饮食喂养的小鼠膝关节组织学改变及RES的效应
    3.4 MMP13 免疫组织化学染色结果
    3.5 高脂饮食喂养的小鼠软骨组织NLRP3、caspase-1及IL-1βmRNA表达以及RES的作用
    3.6 高脂饮食喂养的小鼠软骨组织NLRP3/caspase-1/IL-1β轴相关蛋白表达情况及RES的作用
        3.6.1 NLRP3 蛋白免疫组织化学染色结果
        3.6.2 Caspase-1 蛋白免疫组织化学染色结果
        3.6.3 IL-1β蛋白免疫组织化学染色结果
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3739668