超顺磁性脂质体载Survivin基因对骨肉瘤细胞影响的研究

发布时间：2023-02-19 07:43

　　目的:制备超顺磁性脂质体作为基因载体,并评估载体条件和生物安全性。优化体外转染条件,提高磁转染效率。探讨携带Survivin干扰基因的磁性脂质体对骨肉瘤MG-63细胞生物学行为的影响。方法:1.采用化学共沉淀法制备Fe₃O₄纳米粒子,将其和Lip2000制成磁性脂质体。通过琼脂糖凝胶电泳观察质粒结合能力。Zeta电位分析仪和振动样品磁强计(VSM)用于检测载体的Zeta电位和磁性。透射电子显微镜(TEM)用于观察转染细胞的能力。细胞划痕法和MTT法评估磁性脂质体的细胞毒性。2.用倒置荧光显微镜,观察不同磁性场作用时间下转染人肾上皮细胞(HEK-293)后GFP绿色荧光的表达,从而优化转染条件,以及转染骨肉瘤细胞(MG-63、143b)的能力。流式技术检测转染后GFP表达强度,并评估转染效率。3.构建Survivin干扰质粒,CTL发光法、CCK8法检测磁性脂质体载干扰基因对骨肉细胞MG-63细胞活性和增值的影响;Tanswell检测对细胞迁徙的影响;PI-Hoechst试剂盒检测对MG-63细胞凋亡的影响。结果:1.凝胶电泳显示构建的所含磁性...

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

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英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 超顺磁性脂质体复合物制备和表征
    1 材料和方法
    2 实验结果
    3 讨论
第二部分 超顺磁性脂质体细胞转染和体外抑瘤的研究
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
参考文献
全文总结
文献综述
    参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文



本文编号：3745813