多光子显微成像技术用于监测雷帕霉素促进大鼠脊髓损伤修复的基础研究

发布时间：2023-04-05 18:45

　　目的:建立大鼠脊髓损伤模型,利用多光子显微成像技术观察雷帕霉素是否通过SCI损伤后早期激活自噬促进损伤区域神经元的存活和轴突的延长,揭示脊髓损伤后自噬激活对神经元细胞及轴突的影响及对大鼠后肢运动功能的保护作用。方法:(1)清洁级SD雌性大鼠,随机分为4组:正常对照组、安慰剂组、雷帕霉素组、3-MA组,Allen法建立大鼠脊髓损伤模型(打击部位为T10),并用BBB评分评价损伤后不同时间点(1h、6h、1d、3d、5d、7d、10d)各组大鼠后肢运动功能的改变情况;(2)在损伤后不同时间点处死老鼠,取脊髓组织标本,Western blot检测自噬相关蛋白LC3II、Beclin1的表达,观察损伤后不同组别、不同时间点自噬蛋白的表达情况(3)将收集的脊髓标本进行切片,HE染色法于普通光镜下观察脊髓组织的变化情况并后期与多光子显微镜下观察的图像进行对比;(4)在多光子显微镜下进行观察,利用先进的图像分析和光谱分析技术,从微结构和光谱角度反映不同阶段神经纤维的形态结构特征,获得能够定量反映轴突损伤修复过程不同阶段轴突坏死及存活的变化趋势的光学参数指标。结果:(1)从损伤后第5d时间点开始,雷帕...

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第一部分:自噬在大鼠脊髓损伤中的作用
    1.1 前言
    1.2 材料和方法
    1.3 结果
    1.4 讨论
    1.5 小结
    1.6 参考文献
第二部分:多光子显微镜监测调控自噬下脊髓损伤的修复进程
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
    2.3 结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
    2.6 参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3783931