A型肉毒毒素关节腔注射对大鼠关节炎疼痛的治疗作用及机制研究

发布时间：2023-04-08 17:48

　　目的:观察踝关节注射A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A,BoNT/A)对佐剂性关节炎大鼠疼痛行为及脊髓中枢水平小胶质细胞激活、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响,探讨BoNT/A对佐剂性关节炎疼痛的治疗作用及可能的机制。方法:实验1.本研究随机选取80只雄性SD大鼠左踝关节腔注射50μl完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)制作佐剂性关节炎疼痛模型,另选16只大鼠注射同等体积生理盐水作为对照,并分别于建模前1天及建模后第1、3、7、14和21天对大鼠机械痛阈和热痛阈进行测定以及应用HE染色技术观察踝关节病理变化。评估CFA造模情况。实验2.造模成功后,对大鼠左踝关节腔注射BoNT/A进行干预,并按照注射浓度不同分为1UBoNT/A组、5UBoNT/A组、10UBoNT/A组,CFA组及sham组再次注射同等体积生理盐水。实验过程中剔除造模失败或死亡的大鼠,最终以每组16只SD大鼠纳入实验。即5组分别为sham组、CFA组、1UBoNT/A组、5UBoNT/A组、10UBo...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一部分 经踝关节腔注射完全弗氏佐剂制作佐剂型关节炎疼痛大鼠模型
    材料和方法
        1.实验动物
        2.主要实验仪器与试剂药品
            2.1 主要实验仪器
            2.2 主要实验试剂药品
        3.实验分组
        4.佐剂性关节炎疼痛模型制作
        5.疼痛行为学测试
            5.1 机械痛撤足阈值测试
            5.2 热痛阈潜伏期测试
        6.踝关节病理组织学观察
        7.统计学处理
    结果
    讨论
第二部分 A型肉毒毒素踝关节腔注射对佐剂性关节炎疼痛大鼠模型治疗作用
    材料与方法
        1.实验动物
        2.主要实验仪器及试剂药品
            2.1 主要实验仪器
            2.2 主要实验试剂
        3.动物分组
        4.模型建立
        5.BoNT/A关节腔注射
        6.疼痛行为测试
            6.1 机械痛撤足阈值测试
            6.2 热痛阈潜伏期测试
        7.统计学处理
    结果
    讨论
第三部分 A型肉毒毒素治疗大鼠慢性炎症性疼痛的作用机制研究
    材料与方法
        1.实验动物及分组
        2.主要实验仪器与实验试剂
        3.组织获取
        4.组织总蛋白提取
        5.Western Blot分析
        6.免疫荧光组织化学
            6.1 灌注取材
            6.2 组织蜡块的制作和切片
            6.3 免疫荧光染色
        7.定量RT-PCR分析
            7.1 逆转录(RT)
            7.2 引物设计
            7.3 RT-PCR
        8.ELISA检测
        9.同源性建模与分子对接
        10.数据处理
    结果
    讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录
致谢



本文编号：3786208