Wnt/β-catenin抑制剂IWR-1对瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及机制研究

发布时间：2023-08-09 16:48

　　瘢痕疙瘩(keloid)是一种良性的皮肤纤维增生性疾病,通常源于皮肤创伤并向周围扩展超过原有损伤范围。该病的特征是胶原等细胞外基质(ECM)过度沉积,瘢痕呈持续增长而无自愈倾向。瘢痕疙瘩不仅影响美观,还能引起疼痛、瘙痒等伴随症状,发生在关节部位甚至影响关节功能。迄今为止,其具体发病机理仍不明确,可能与细胞因子(如TGF-β)、胶原代谢障碍、遗传因素等有关。由于单纯手术切除后极易复发,目前国内外通常采用药物注射、外科手术、局部放疗、加压疗法等多种治疗手段相结合,然而目前仍无理想的治疗方法。Wnt/β-catenin信号通路在诸如细胞增殖凋亡,细胞分化和肿瘤形成等多种生理活动中起到重要作用。近几年,越来越多的证据表明Wnt/β-catenin信号传导通路与包括病理性瘢痕在内的多种纤维化疾病的发病机制相关,例如在瘢痕疙瘩组织中β-catenin表达显著增强,用TGF-β刺激成纤维细胞能导致Wnt/β-catenin信号传导通路上调。另有研究表明与正常皮肤相比,瘢痕疙瘩中Wnt5a和β-catenin的表达也明显增强。这些结果提示Wnt/β-catenin信号传导通路可作为瘢痕疙瘩等纤维化疾病...

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

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Abstract
英文缩略词
第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 文献综述:瘢痕疙瘩的发病机制及治疗
        1.2.1 简介
        1.2.2 发病机制相关因素
        1.2.3 纤维化相关信号通路
        1.2.4 瘢痕疙瘩的治疗
第2章 实验材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 瘢痕疙瘩及正常皮肤组织
        2.1.2 主要实验仪器和实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 原代细胞的培养
        2.2.2 成纤维细胞的鉴定
        2.2.3 细胞毒性实验
        2.2.4 实验分组
        2.2.5 细胞增殖实验
        2.2.6 TOPflash/FOPflash实验
        2.2.7 细胞迁移实验(划痕实验)
        2.2.8 免疫印迹实验(Western blot)
        2.2.9 酶联免疫吸附测定法(ELISA)
        2.2.10 胶原凝胶收缩实验
        2.2.11 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
        2.2.12 明胶酶谱分析法
        2.2.13 罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色
    2.3 数据处理和分析
第3章 实验结果
    3.1 成纤维细胞形态学观察
    3.2 成纤维细胞的鉴定
    3.3 IWR-1对成纤维细胞的细胞毒性
    3.4 IWR-1对内源性Wnt/β-catenin信号通路的作用
    3.5 IWR-1对成纤维细胞增殖和迁移的作用
    3.6 IWR-1对成纤维细胞胶原生成的作用
    3.7 IWR-1对细胞外基质转录活性(mRNA)的作用
    3.8 IWR-1对胶原收缩的作用
    3.9 IWR-1对TGF-β/Smad通路和肌成纤维细胞分化的影响
    3.10 IWR-1对成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)的作用
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3840607