MicroRNA-152-5p调节瘢痕疙瘩中Smad3相关通路的作用及调控机制

发布时间：2023-10-06 14:30

　　瘢痕疙瘩是创伤愈合最常见的病理形式,特征是超过原始边界的侵袭性生长和细胞外基质如胶原蛋白的过度产生,但其病因和机制尚不清楚。瘢痕疙瘩严重影响外观和身体功能,缺乏有效的治疗方法,且手术切除后复发率高。因此联合基因治疗成为了新的研究热点。目前已有许多研究表明,miRNA参与多种病理过程,并在纤维化过程中发挥重要作用。在这项研究中,我们研究了 miR-152-5p在瘢痕疙瘩中的作用和调节机制。与正常对照组织及其成纤维细胞相比,miR-152-5p在瘢痕疙瘩组织和原代成纤维细胞中表达均显著下调。此外,研究发现miR-152-5p的下调与瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,迁移,侵袭功能和细胞凋亡率相关。miR-152-5p的过表达显著抑制了瘢痕疙瘩中纤维化的进程。Smad3是miR-152-5p的直接靶标,在瘢痕疙瘩中高表达。敲低Smad3和过表达miR-152-5p均可以抑制纤维化进展。另外,我们研究发现miR-152-5p和Smad3,可能是通过调节Erkl-2和Jak2/Stat3/Akt途径及3型胶原蛋白的产生而发挥作用。总之,我们的研究表明参与纤维化进展的miR-152-5p/Smad3调节途...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
中文摘要
英文摘要
英文缩略表
引言
1 实验材料
    1.1 实验组织
    1.2 实验细胞
    1.3 实验试剂
    1.4 常用液体的配置
    1.5 实验仪器和设备
    1.6 实验的伦理
2 实验样本的入选标准和制备方法
    2.1 组织样本的选材
    2.2 组织样本的处理
    2.3 组织样本总RNA的提取
    2.4 原代细胞的培养
    2.5 细胞样本总RNA的提取
    2.6 细胞总蛋白的提取
    2.7 转染细胞的制备
    2.8 载体构建
3 实验方法
    3.1 miR-152-5p在瘢痕疙瘩中表达水平的变化
    3.2 转染后的表达变化
    3.3 CCK8实验
    3.4 Transwell迁移和侵袭实验
    3.5 划痕实验
    3.6 细胞周期实验
    3.7 细胞凋亡实验
    3.8 荧光双报告基因实验
    3.9 WB方法检测相关蛋白表达水平变化
    3.10 结果统计分析和图形处理
4 数据和结果
    4.1 第一部分 miR-152-5p对瘢痕疙瘩纤维化相关功能的影响及机制
    4.2 第二部分 Smad3表达在瘢痕疙瘩纤维化进程中的作用
    4.3 第三部分 验证miR-152的靶点Smad3
    4.4 第四部分 miR-152-5p与Smad3在瘢痕疙瘩纤维化中的作用及机制
5 讨论与结论
6 参考文献
综述
    参考文献
作者简介



本文编号：3851883