石墨烯导管促进周围神经长段缺损再生研究

发布时间：2023-10-21 12:20

　　目的周围神经缺损伤广泛发生于严重外伤后,常引起支配区域的感觉和运动功能障碍,极大影响患者生活质量,且疗效不佳。神经导管的应用逐渐成为替代方案。为了最大限度地模拟体内生长环境,理想的神经导管应具备机械引导、电流传导和刺激血管再生的功能。然而大部分神经导管只能起到机械性通道的作用,因此神经修复情况仍不满意。本课题将制备氧化石墨烯纳米粒/聚己内酯导电神经导管,并探究其在促进周围神经长段缺损再生中的作用,同时探讨潜在修复机制。方法采用一体成型工艺制备氧化石墨烯/聚己内酯神经导管,通过扫描电镜和透射电镜分别观察导管表面结构和氧化石墨烯纳米颗粒结构;此外,检测氧化石墨烯与聚己内酯间作用力、神经导管弹性模量、断裂伸长率及导电能力。分别制备氧化石墨烯/聚己内酯支架和聚己内酯支架,体外实验培养施旺细胞,观察施旺细胞在不同支架上的形态结构,通过活死细胞染色、CCK法、免疫荧光染色、Western Blot、q-PCR法检测细胞毒性、增殖、黏附水平及神经标记物表达。建立15mm大鼠坐骨神经缺损模型,在术后6周、12周和18周评估功能学、电生理学、组织形态学水平,同时检测损伤区域微血管化程度,并测定血管形成相...

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
中文部分
    第一章 绪论
        1.1 研究背景
        1.2 研究现状
            1.2.1 神经导管的种类和特点
            1.2.2 神经导管的内外微环境
            1.2.3 电刺激与导电神经导管
    第二章 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管的制备与表征
        2.1 引言
        2.2 材料与方法
            2.2.1 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管制备
            2.2.2 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管表征
            2.2.3 数据统计分析
        2.3 结果
        2.4 讨论
        2.5 本章小结
    第三章 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管的体外生物相容性实验
        3.1 引言
        3.2 材料与方法
            3.2.1 神经导管支架材料准备与消毒
            3.2.2 施旺细胞培养
            3.2.3 施旺细胞增殖、毒性实验
            3.2.4 施旺细胞微观形态扫描电镜实验
            3.2.5 倒置荧光显微镜观察实验
            3.2.6 蛋白质印迹法(Western Blot)、实时荧光定量核酸扩增检测(quantitative PCR)
            3.2.7 数据统计分析
        3.3 结果
        3.4 讨论
        3.5 本章小结
    第四章 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管修复坐骨神经缺损实验
        4.1 引言
        4.2 材料与方法
            4.2.1 建立大鼠坐骨神经缺损模型
            4.2.2 大体观察
            4.2.3 功能学检测——步态分析
            4.2.4 电生理学检测
            4.2.5 组织形态学检测
            4.2.6 免疫组织化学染色检测
            4.2.7 蛋白质印迹法(Western Blot)
            4.2.8 数据统计分析
        4.3 结果
        4.4 讨论
        4.5 本章小结
    第五章 全文总结
英文部分
    Chapter 1 Introduction
        1.1 Background
        1.2 Research Status
            1.2.1 Types and Characteristics of Nerve Conduits
            1.2.2 Internal and External Microenvironment of Nerve Conduits
            1.2.3 Electrical Stimulation and Conductive Nerve Conduits
    Chapter 2 Preparation and Characterization of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        2.1 Introduction
        2.2 Materials and Methods
            2.2.1 Preparation of GO/PCL Nerve Conduit
            2.2.2 Characterization of GO/PCL Nerve Conduit
            2.2.3 Statistical Analysis
        2.3 Results
        2.4 Discussion
        2.5 Conclusion
    Chapter 3 In Vitro Biocompatibility Studies of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        3.1 Introduction
        3.2 Materials and Methods
            3.2.1 Preparation and Disinfection of Nerve Conduit Materials
            3.2.2 Schwann Cell Culture
            3.2.3 Schwann Cell Proliferation and Toxicity Assays
            3.2.4 Microscopic Morphology of Schwann Cells with SEM
            3.2.5 Cell Observation with Inverted Fluorescence Microscopy
            3.2.6 Western Blot and Real-time Quantitative PCR
            3.2.7 Statistical Analysis
        3.3 Results
        3.4 Discussion
        3.5 Conclusion
    Chapter 4 In Vivo Repair of Sciatic Nerve Defects by Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        4.1 Introduction
        4.2 Materials and Methods
            4.2.1 Rat Sciatic Nerve Defect Model
            4.2.2 General Observation
            4.2.3 Functional Evaluation-Gait Analysis
            4.2.4 Electrophysiological Tests
            4.2.5 Histomorphological Evaluation
            4.2.6 Immunohistochemical Staining Evaluation
            4.2.7 Western Blot
            4.2.8 Statistical Analysis
        4.3 Results
        4.4 Discussion
        4.5 Conclusion
    Chapter 5 Overall Conclusions
参考文献
致谢
攻读博士学位期间已发表或录用的论文
八年制学位论文要求



本文编号：3855821