SENP1降低骨肉瘤干性维持并增加HSVtk/GCV敏感性的研究

发布时间：2024-02-03 11:10

　　目的:探索SUMO1及SENP1在骨肉瘤发生发展中的作用;明确SUMO1与SENP1在骨肉瘤细胞干性维持中的作用,以及对传统化疗敏感性的影响;以期为骨肉瘤的治疗尤其是对化疗不敏感的骨肉瘤干细胞的治疗提供一种新的治疗策略。方法:(1)(1)收集18例骨肉瘤患者标本,分别制备提取骨肉瘤组织与邻近肿瘤旁组织总蛋白,免疫蛋白印迹法检测SUMO家族成员SUMO1与SENP1在骨肉瘤组织中的表达;(2)免疫蛋白印迹法检测hFOB1.19及143B、MG-63和U-2OS中SUMO1及SENP1的表达;(3)CD133抗体标记143B细胞,流式细胞仪分选CD133⁺细胞和CD133^-细胞后将CD133⁺细胞和CD133^-细胞分别培养,检测SUMO1与SENP1蛋白表达差异;(4)使CD133⁺骨肉瘤干细胞分别处于细胞周期的静止期、增殖期和衰老期,免疫印迹法检测不同细胞周期SUMO1及SENP1蛋白表达水平及干性维持相关基因Oct4、HIF-1α及PCNA蛋白表达水平。(2)(1)RNA干扰沉...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1SENP1骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中的表达（A）通过蛋白质印迹检测SENP1，SUMO1在骨肉瘤和邻近组织中的表达

图1SENP1骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中的表达（A）通过蛋白质印迹检测SENP1，SUMO1在骨肉瘤和邻近组织中的表达。**与肿瘤组相比，P<0.01。（B）通过蛋白质印迹检测SENP1，SUMO1在具有不同分化等级的骨肉瘤细胞系中的表达。与hFOB1.19组相....

图2SUMO1基因沉默诱导骨肉瘤干细胞经历快速老化，强烈抑制细胞增殖和迁移，并诱导细胞凋亡（A）在SUMO1基因沉默后检测SUMO1的表达

19图2SUMO1基因沉默诱导骨肉瘤干细胞经历快速老化，强烈抑制细胞增殖和迁移，并诱导细胞凋亡（A）在SUMO1基因沉默后检测SUMO1的表达。（B）SUMO1基因沉默（比例尺，50μm）后骨肉瘤干细胞的克隆球形态的改变。（C）通过流式细胞术检测的CD133+1....

图3SENP1过表达显著降低干性维持，但仅略微影响骨肉瘤干细胞的迁移和凋亡（A）通过蛋白质印迹检测SENP1基因转导后的蛋白质SENP1，SUMO1的表达

21图3SENP1过表达显著降低干性维持，但仅略微影响骨肉瘤干细胞的迁移和凋亡（A）通过蛋白质印迹检测SENP1基因转导后的蛋白质SENP1，SUMO1的表达。（B）SENP1基因转导后的骨肉瘤干细胞的克隆球形态的改变（比例尺，50μm）。（C）在CD133+....

图4SENP1过表达显著增加骨肉瘤干细胞对HSVtk/GCV的体外敏感性（A）通过蛋白质印迹检测HSVtk基因转导效率

天津医科大学硕士学位论文白质（PCNA，Oct4，HIF-1α和Akt1），肿瘤细胞迁移相关蛋白（MMP2和MMP9）和凋亡相关蛋白Caspase-3。略微增加，流式细胞凋亡显示与单独处理组相比，联合处理组经历着轻微的细胞凋亡（图4B-D）。与图3F中显示的结果类似....

本文编号：3894084