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MicroRNA-146a介导IL-6/STAT3信号通路在腰椎间盘退行性变中的机制研究

发布时间:2024-02-24 10:26
  目的研究MicroRNA-146a介导IL-6/STAT3信号通路在腰椎间盘退行性变中的机制。方法选择10例腰椎间盘突出症患者(观察组)和10例腰椎爆裂性骨折或骨折脱位需要减压融合内固定手术的患者(对照组),手术取得病灶髓核组织,qPCR法检测MicroRNA-146a表达,进行细胞培养和髓核细胞慢病毒转染预实验;分别采用MicroRNA-146a 空载体、MicroRNA-146a mimic 和 MicroRNA-146a inhibitor 与两组细胞共培养24h,检测转染效率;采用ELISA法检测细胞IL-6、Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)水平,Western blot法检测STAT3、基质金属蛋白酶(MMP)-3和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)表达水平。结果观察组细胞MicroRNA-146a水平明显高于对照组,对照组处理前后IL-6、ColⅡ、aggrecan、STAT3、MMP-3和ADAMTS水平比较均无差异(P>0.05)。处理前观察组细胞 MicroRNA-146a、IL-6、STAT3、MMP-3 和...

【文章页数】:89 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

图1时定量PC艮法检测MicroRNA-146a水平(观察组MicroRNA-146a水平??

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??图1实时定量PC艮法检测MicroRNA-146a水平(观察组MicroRNA-146a水平??明盈高于对照组)??Figure?1;?Detection?of?MicroRNA-146a?levels?via?real-time?quantitative?PC民(level....


图2倒置相差愚微镜下观察第2代细胞(200x,短梭形为主,折光性好,可见??短而粗的突起,向四周呈树枝状发出,有次级突

图2倒置相差愚微镜下观察第2代细胞(200x,短梭形为主,折光性好,可见??短而粗的突起,向四周呈树枝状发出,有次级突

为了观察miR-146a对髓核细胞的调控作用,本实验,利用酶消化法获得原??代髓核细胞。倒置相差显微镜下观察第2代细胞,W短梭形为主,折光性好,??可见短而粗的突起,向四周呈树枝状发出,有次级突。(见图2)。??图2倒置相差愚微镜下观察第2代细胞(200x,短梭形为主,折光性好,....


图4;四组培养条件下的慢病毒感染效果??Figure?4;?The?efFiency?of?lentivinis?infection?in?four?different?conditions??

图4;四组培养条件下的慢病毒感染效果??Figure?4;?The?efFiency?of?lentivinis?infection?in?four?different?conditions??

南京医科大学博±学位论文??mimic、miR-146a?mimic?control、miR-146泣?inhibitor?及?miR-146a?inh化itor?control??转染入髓核细胞中。而在进行慢病毒转染之前,需做预实验。如图4所示最佳??感染条件为MOI=10添加....


图5;细胞转染鉴定细胞MicroRNA-146amRNA水平(A为转染前,观察组明??

图5;细胞转染鉴定细胞MicroRNA-146amRNA水平(A为转染前,观察组明??

MicroRNA-146a?mRNA?水平提高?15?倍,而?MicroRNA-146a?i血bitor?处理后??MicroRNA-146amRNA水平降低至原来1/3,证实转染效果较好。转染前观察组??细胞MicroRNA-146amRNA水平明显高于对照组(P<0.05)。....



本文编号:3908855

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