14-3-3ε激活NF-κB通路参与氧糖剥夺/再灌注诱导的原代培养大鼠脊髓星形胶质细胞活化
发布时间:2024-02-29 21:15
目的:研究14-3-3ε蛋白对氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation reperfusion,OGDR)诱导的脊髓星形胶质细胞活化的影响及其机制。方法:原代培养新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞建立OGDR模型,用CCK-8试剂盒检测细胞活力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性检测试剂盒检测LDH活性,用ELISA法检测谷氨酸浓度、TNF-α和IL-1β的表达,Real-Time PCR和Western Blot分别检测14-3-3εmRNA和蛋白表达,用Western Blot检测核转录因子-B(Nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)、星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、胶质瘢痕标志物neurocan和phosphacan蛋白的表达;转染14-3-3εsiRNA沉默14-3-3ε表达,将细胞分为对照组、OGDR组、非特异性转染(Scramble)组和14-3-3εsiRNA组,检测14-3-3εsi...
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
材料和方法
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
2 方法
2.1 细胞培养和鉴定
2.2 OGDR模型的建立
2.3 siRNA转染
2.3.1 CCK-8
2.3.2 LDH活性检测
2.3.3 ELISA法
2.4 Real-Time PCR
2.5 Western Blot
结果
1细胞鉴定
2 OGDR诱导星形胶质细胞损伤
3 OGDR诱导星形胶质细胞活化及胶质瘢痕形成
4 14-3-3ε在星形胶质细胞OGDR后表达增加
5 14-3-3εsiRNA转染对14-3-3ε表达的影响
6 14-3-3ε基因沉默对OGDR诱导的星形胶质细胞活化和胶质瘢痕形成的影响
7 14-3-3εsiRNA抑制NF-κB表达阻碍星形胶质细胞活化
讨论
本文编号:3914934
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
材料和方法
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
2 方法
2.1 细胞培养和鉴定
2.2 OGDR模型的建立
2.3 siRNA转染
2.3.1 CCK-8
2.3.2 LDH活性检测
2.3.3 ELISA法
2.4 Real-Time PCR
2.5 Western Blot
结果
1细胞鉴定
2 OGDR诱导星形胶质细胞损伤
3 OGDR诱导星形胶质细胞活化及胶质瘢痕形成
4 14-3-3ε在星形胶质细胞OGDR后表达增加
5 14-3-3εsiRNA转染对14-3-3ε表达的影响
6 14-3-3ε基因沉默对OGDR诱导的星形胶质细胞活化和胶质瘢痕形成的影响
7 14-3-3εsiRNA抑制NF-κB表达阻碍星形胶质细胞活化
讨论
本文编号:3914934
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/3914934.html
最近更新
教材专著